PBMC復蘇培養液
試用種屬:人PBMC,大鼠PBMC,小鼠PBMC,猴PBMC,比格犬PBMC,兔PBMC,豬PBMC等
凍存外周血單個核細胞PBMC復蘇時,需搭配使用PBMC復蘇培養也使用,避免細胞結團。
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外周血單個核細胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)是指外周血中具有單個細胞核的細胞,包括淋巴細胞,單核細胞等。
提取方法:
全血樣本聚蔗糖-泛影葡胺(Ficoll-Hypaque)密度梯度離心分離
外周血單個核細胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC),是指外周血中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞(Lymphocyte)、單核細胞(Monocyte)、樹突狀細胞(DC)和其他少量細胞。PBMC可利用健康人或動物供體的外周血,通過Ficoll密度梯度離心,磁珠分選等步驟獲得,主要包括淋巴細胞和單核細胞。
Ficoll是蔗糖的多聚體,中性,平均分子量400,000,當密度為1.2g/mL,未超出正常生理性滲透壓,也不穿過生物膜。紅細胞、粒細胞比重大,離心后沉于管底;淋巴細胞和單核細胞的比重小于或等于分層液比重,離心后漂浮于分層液的液面上,也可有少部分細胞懸浮在分層液中。吸取分層液液面的細胞,就可從外周血中分離到單個核細胞。
PBMC中大部分都是淋巴細胞,包括B細胞和T細胞,其中CD3 T細胞又占了淋巴細胞中絕大部分(45-70%)。這些T細胞都處于初始(naive)狀態,即已經成熟了但沒有受到抗原刺激。 在正常人中,只有非常小的一部分初始T細胞會因抗原識別而被激活。同樣的B細胞也都處于初始狀態。相對于淋巴細胞,單核細胞的比例在10-30%,收到刺激之后會發育成樹突狀細胞(DC)或巨噬細胞。干細胞的比例非常低,只有0.1-0.2%,因此很難從全血樣本中分離到。
ADME服務項目
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