隨著醫療事業的快速發展，PCR試劑，熒光PCR試劑等的凍干迅速崛起。很多企業在開發PCR試劑的凍干。PCR試劑的凍干就是配制的液態PCR檢測體系添加凍干保護劑（包括賦形劑）后，先預先凍結為固體，在真空條件下，利用物質的升華，使物料低溫脫水而達到試劑干燥的目的。在冷凍干燥過程中熱敏性物質（如酶、dntp等）不會發生變性或失活，能保持原來的活性；凍干前后試劑體積變化很小，保持了原來的結構；干燥過程在真空下進行，氧氣極少，易氧化的物質能夠得到保護；冷凍干燥能排除95％～99％以上的水分，使干燥后產品能長期保存而不致變質。冷凍干燥整個干燥過程在低溫中進行，PCR試劑活性不會受到影響。因此與常規液態PCR試劑相比凍干試劑有著常溫穩定、擺脫冷鏈、即時活化、不相容試劑共存、無交叉污染等很多明顯優勢。
所有的凍干包括藥物的凍干和試劑的凍干，原理都是一樣的，都是在含有保護劑的情況下，將我們要保護的試劑或者物質進行凍干。其中凍干保護劑起了很大的作用，如果沒有凍干保護劑的添加，很多物質是不能完好的凍干的。凍干保護劑使得本來不適合凍干的物質能夠獲得良好的凍干狀態。常見的凍干保護劑包括：糖類、醇類、氨基酸類、聚合物類、表面活性劑類、鹽類、大分子活性物質類等，這么多的種類應該如何選擇呢？對于凍干保護劑的選擇不一定，凍干的曲線不一樣，凍干的本體物質的濃度不一樣，反應體系不一樣，所以終凍干的結果，凍干的時間成本等是不同的。而對于凍干保護劑有些通用的常用的物質如海藻糖、蔗糖、甘露醇、PEG、pvp等。但是除了這些常用的還有很多如甘油、乳糖、半乳糖、組氨酸、精氨酸、甘氨酸、右旋糖苷、吐溫80、吐溫100、環糊精、明膠、維生素C、維生素B、牛血清、二硫蘇糖醇、吐溫20、明膠等，這些都是很好的凍干保護劑或者賦形劑。因此對于同一個試劑的凍干可以選擇的凍干保護劑是很多的。
凍干保護劑的篩選看似簡單，但是需要大量的工作量，如果想獲得一個高效穩定的PCR凍干體系，需要進行大量的實驗，保護劑的篩選實驗，凍干曲線的優化實驗等。先選擇種類濃度，再進行優化組合。同樣組分的保護劑用在不同的PCR反應體系可能凍干的曲線，凍干的質量都會有差別，這是由于本體物質不一樣，實驗的條件也不*一樣，因此對于凍干沒有一個通用的保護劑，需要針對自身的反應體系進行開發。
叔丁醇是一種特殊的凍干保護劑加速劑，可以起到凍干保護劑、賦形劑和加速劑的作用。如《一種凍干添加劑及熒光PCR反應混合物干粉 和制備方法》所述加入叔丁醇做保護劑的熒光pcr反應體系的效率能大大提高，而且預凍溫度，升華溫度，解析溫度都能大大提高，如作者所述叔丁醇在PCR試劑分裝好準備凍干之前按體積比加入， 混合后可提高混合物共晶點15-20度，在凍干顯微鏡下，叔丁醇升華后形成的微通道有利于 水分的析出，也加快了升華解析的速度。通過對保護劑的篩選優化，熒光PCR反應混合物含有凍干添加劑，不僅擴增性能好，又節省凍干時 間，顯著的優點在于： 1、提高了共晶點，預凍溫度從常見的-40℃～-30℃提高到-15℃； 2、凍干時間僅需3小時；3、凍干的成品在試劑管中形態完整，晃動不易碎； 4、凍干組分復溶良好，并且有良好的穩定性。從以上可以看出經過優化的凍干保護劑和凍干曲線效率大大提高，而對于常規的保護劑未優化的保護劑和凍干曲線，一般的PCR反應體系的凍干時間在24小時，而經過優化篩選后效率可以大大提高，而對于有的可能酶的凍存過程中添加了一定的保護劑，保護劑濃度合適可能不需要再添加保護劑也可以很容易的凍干。凍干保護劑屬于凍干配方輔料的篩選，對于很多物質的凍干是*的。制藥和試劑凍干基本上都需要添加一種或者多種保護劑。
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