詳細介紹
一、PCR實驗室的設計原則
標準的PCR實驗室一般分為4個區域:一區為試劑準備區,二區為標本制備區,三區為PCR擴增區,四區為產物分析區。
為避免交叉污染,進入各個工作區域必須嚴格遵循單一方向進行,即只能從試劑貯存和準備區→標本制備區→擴增反應混合物配制和擴增區→擴增產物分析區。各實驗區之間的試劑及樣品傳遞應通過傳遞窗進行。
二、PCR實驗室各分區介紹
2.1試劑準備區(1區)
該實驗區主要進行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應混合液的制備。試劑和用于標本制作的材料應直接運送至該區,不得經過其他區域。試劑原材料必須貯存在本區內,并在本區內制備成所需的貯存試劑。
房間的面積宜控制在15㎡~20㎡。本區的壓力梯度要求為:相對正壓狀態,以防止外界含核酸氣溶膠的空氣進入,造成污染。
2.2標本制備區(2區)
該區域主要進行的操作為臨床標本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定RNA時cDNA的合成。
標本制備區的面積宜在25㎡~30㎡之間。本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為正壓,以避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染。另外,由于在加樣操作中可能會發生氣溶膠所致的污染,所以應避免在本區內不必要的走動。
2.3 擴增反應混合物配制和擴增區(3區)
該區域主要進行的操作為DNA或cDNA擴增。此外,已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區)的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區)制備成反應混合液等也可在本區內進行。
擴增室主要配備PCR實驗室的核心儀器PCR儀,在實驗室建造過程中,需要給PCR儀配備專門的UPS電源,以保證其正常工作。該區面積控制在15㎡~20㎡。
本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免氣溶膠從本區漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應盡量減少在本區內的不必要的走動。個別操作如加樣等應在超凈臺內進行。建議采用≥10Pa壓差,在控制上比較容易實現。
2.4 擴增產物分析區(4區)
該區域主要進行的操作為擴增片段的測定。本區是最主要的擴增產物污染來源,因此對本區的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免擴增產物從本區擴散至其它區域。
在室內配備通風櫥,保證房間內的相對負壓,空氣從室外流向室內。該區面積控制在15m2~20m2。
WOL承接 疾控中心 醫院 PCR實驗室 設計裝修——WOL承接 疾控中心 醫院 PCR實驗室 設計裝修