液相色譜開關機指南
色譜柱沖洗和保存
停機前,將色譜柱*沖洗,使用說明書中指明的溶劑保存色譜柱。
從儀器上卸下色譜柱,用堵頭密封保存。
儀器沖洗和溶劑置換
液相色譜相關單元需全部進行溶液置換和沖洗,防止管路污染或堵塞。
反相色譜置換步驟:
1) 取下色譜柱后用兩通連接管路。
2) 如果流動相中含有緩沖鹽,將相應管路更換為純水,排氣(Purge)5分鐘,再以1.0mL/min流速沖洗色譜系統30分鐘
3) 將儀器所有管路都置換成純甲醇溶液(包括流動相管路比如四元低壓梯度系統A/B/C/D四管路或者二元高壓梯度系統A/B兩管路、進樣器洗針液管路、泵柱塞桿清洗液管路)。
4) 將流動相排氣(Purge)5分鐘,自動進樣器排氣25分鐘,以1.0 mL/min流速沖洗色譜系統30分鐘。
注意:如果流動相中不含緩沖鹽,可跳過步驟2)
正相色譜置換步驟:
1) 取下色譜柱用兩通連接管路。
2) 將儀器所有管路都置換成純異丙醇(包括流動相管路比如四元低壓梯度系統A/B/C/D四管路或者二元高壓梯度系統A/B兩管路、進樣器洗針液管路、泵柱塞桿清洗液管路)。
3) 將流動相排氣(Purge) 5分鐘,自動進樣器排氣25分鐘,以1.0mL/min流速沖洗色譜系統30分鐘。
關機
清理進樣器中的樣品瓶,妥善處理。
清空廢液瓶中的廢液。
關閉所有單元的電源。
接通硬件電源
依次打開液相色譜各單元和電腦的電源開關,觀察液相各單元的綠色指示燈依次亮起。
儀器溶劑置換
反相色譜置換步驟:
1) 將輸送水相的流動相管路置換成超純水,自動進樣器洗針液管路置換成50%甲醇水溶液,柱塞桿清洗管路置換成10%異丙醇水溶液。流動相管路排氣(purge) 5分鐘,自動進樣器管路排氣(purge) 25分鐘。
2) 用1.0 mL/min流速、50%甲醇水溶液為流動相,沖洗色譜系統30分鐘。
正相色譜置換步驟:
1) 將流動相管路按照實驗條件置換成相應溶劑,自動進樣器洗針液管路使用與流動相相同的溶劑作為清洗液。流動相管路排氣5分鐘,自動進樣器管路排氣25分鐘。
2) 用1.0 mL/min流速沖洗色譜系統30分鐘。
方法平衡
按照需要進行的實驗條件配制流動相,將配制好的流動相放在儀器上,執行流動相管路排氣操作后,確認色譜柱在柱溫箱內正確安裝,調用方法文件,啟動液相色譜輸送流動相對色譜柱進行平衡約半小時到一個小時。