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固相萃取法在毒（藥）物分析中的應(yīng)用
閱讀：922 發(fā)布時間：2019-1-16
固相萃取法，也稱液—固萃取法，就是根據(jù)液相色譜法原理，利用毒物在溶劑與吸附劑(固定相)間選擇性吸附與選擇性洗脫的過程，達到分離凈化和富集的目的，即毒物樣品通過裝有吸附劑的小柱后，樣品保留在吸附劑上，先用適當溶劑系統(tǒng)洗去雜質(zhì)，然后再在一定條件下(如不同pH)選用不同極性的溶劑，將待測成分洗脫下來，進行檢測，方法簡單、快速、經(jīng)濟，取樣量小，對環(huán)境無污染，且可為自動化操作準備條件。而傳統(tǒng)的液—液提取法有很多弊病，如：操作比較復(fù)雜，費時； 由于提取時使用大量有機溶劑，危害操作人員身體健康； 其揮發(fā)性氣體易燃、易爆，很不安全，同時污染環(huán)境。另外有機溶劑提取時容易產(chǎn)生乳化使測定結(jié)果發(fā)生誤差。近年來固相萃取技術(shù)已成為*門法醫(yī)毒物分析中很重要的一種樣品預(yù)處理方法。有鑒于此，藥物濫用者排泄物或體液中毒品分析的預(yù)處理今后也應(yīng)多從這方面考慮。不僅如此，在藥品分析中國家麻醉品實驗室已開始將此方法應(yīng)用于各種不同阿片制劑中微量*的分離。
固相萃取技術(shù)的核心是填料。填料種類很多，其中吸附型有硅膠、硅藻土、氧化鋁、活性炭等。化學鍵合相硅膠：正相的有氨基、腈基、二醇基等；反相的有C1、C2、C6、C8、C18、腈基、環(huán)己基、苯基等；離子交換的有季胺、氨基、二氨基、苯磺酸基、羧基等。此外，還有苯乙烯—二乙烯苯聚合和二乙烯苯—氮雜環(huán)聚合分別制得的多孔性樹脂，他們一般為非極性樹脂，若帶有某些極性基團可為中等極性或極性吸附樹脂，其應(yīng)用特點介于活性炭、氧化鋁、硅膠、硅藻土與離子交換劑之間。其中以C18鏈反相分配層析柱及多孔性樹脂適用于生物檢材中藥物或毒物的分離提取。反相SPE柱國外產(chǎn)品有Analytichom Int生產(chǎn)的Bond Elut柱；Waters公司生產(chǎn)的Sep-Pak柱。國產(chǎn)的有河北津楊濾材廠的PT系列品種。多孔樹脂柱國外商品主要有Amberlite XAD系列和日本三菱化成公司的Diaion HP系列，其中XAD-1-XAD-5、HP-0-50為非極性樹脂，XAD-6-XAD-8為中等極性樹脂，XAD-9-XAD-12為極性樹脂。國產(chǎn)品主要有天津試劑二廠的GDX-101-GDX-203系列，上海試劑一廠的401-404系列等品種。
采用固相柱來提取凈化生物體液中的微量毒物或自成分復(fù)雜的藥物中分離有效成分有以下幾個步驟：柱活化、加樣、柱清洗、柱干燥、樣品洗脫、洗脫液進入儀器分析檢測。現(xiàn)以幾個實例的簡單操作步驟具體說明方法的應(yīng)用。
1 SPE法用于阿片及阿片制劑中*的測定
將阿片粉的稀醋酸溶液通過預(yù)先用甲醇—水混合液浸泡后分別用混合液、蒸餾水和pH為9的氨試液沖洗過的C18反相固相柱，加入氨試液將pH調(diào)至9，再用水和含甲醇的醋酸液洗，得洗脫液，然后進行HPLC的*測定。
此法與過去阿片中測定*的石灰法相比，無論從人力物力及時間消耗上，其*性都十分顯著。
2 SPE法用于可疑阿片類吸毒者或吸毒者戒毒過程中戒毒情況的檢查
采用尿液為檢材，將其酸或酶水解液，調(diào)到近中性，混以0.05M硼砂緩沖液(pH9.0)，通過甲醇、蒸餾水及硼砂緩沖液沖洗過的 C18 反相固相柱[3]， 甲醇—水混合液洗柱，甲醇洗脫*，洗脫液用HPLC法檢測*。
3 海洛因濫用者尿中單乙酰*的提取和鑒定
尿液加緩沖液(pH9.0)，該溶液pH應(yīng)在8-9之間。通過順次用甲醇及蒸餾水洗過的C18反相固相柱，用蒸餾水洗柱，加濃氨水，再用蒸餾水洗，柱子通空氣使其干燥，用二氯甲烷-丙酮混合液洗柱，洗脫液60℃蒸發(fā)，殘留物溶于上述混合液中，溶液在65℃充氮蒸發(fā)，加五氟丙酸酐(PFPA)試劑衍生化，衍生物用GC-MS進行鑒定
固相萃取技術(shù)有時用一種吸附劑的固相柱并不能達到有效成分良好分離和富集的目的，有時需用混合吸附劑，如興奮劑苯丙胺和甲基苯丙胺可用C8和SCX(強陽離子交換劑)混合吸附劑來分離[5]， 效果較好，當酸性、中性、鹼性藥物混合在一起時， 可采用混合型鍵合硅膠固相柱來達到分離的目的， 影響提取效果的參數(shù)很多，除吸附劑外還有樣品的pH值、分析物在吸附劑上保留時的pH、淋洗溶液及樣品洗脫液的選擇等。總之，固相萃取技術(shù)雖然優(yōu)點很多，如有很強的實用價值，小柱可重復(fù)使用。但在實踐中要得到良好的分離效果，需花費較多時間去優(yōu)選操作條件，并且商品化小柱價格也比較昂貴。
參考文獻：
1、McDowall RD. Sample preparation for biomedical analysis. J Chromatogr，1989，492: 3-58.
2、Logan BK, Stafford DT, Tebbett IR,et al. Rapid screening for 100 basic drugs and metabolites in urine using cation exchange solid-phase extraction and high-performance liquid chromatography with diode array detection. J Anal Toxicol, 1990， 14(3)： 154-159.
3、Drost RH, van Ooijen RD, Ionescu T, et al. Determination of morphine in serum and cerebrospinal fluid by gas chro_matography and selected ion monitoring after reversed-phase column extraction. J Chromatogr, 1984， 14;310(1)：193-198.
4、Fehn J, Megges G . Detection of O6-monoacetylmorphine in urine samples by GC/MS as evidence for heroin use. J Anal Toxicol， 1985; 9(3)： 134-138.
5、Lee MR, Yu SC, Lin CL, et al. Solid-phase extraction in amphetamine and methamphetamine analysis of urine. J Anal Toxicol, 1997, 21(4)： 278-282.