Shuffle T7-K12 感受態(tài)細(xì)胞產(chǎn)品介紹：

  Shuffle T7-K12菌株來(lái)源于大腸桿菌K12菌株，適用于T7啟動(dòng)子啟動(dòng)的蛋白表達(dá)。細(xì)胞內(nèi)組成型表達(dá)的二硫鍵異構(gòu)酶DsbC不僅有利于表達(dá)蛋白形成正確的二硫鍵，并具有分子伴侶的功能，幫助不含二硫鍵的蛋白正確折疊。T7 RNA聚合酶基因整合在細(xì)菌染色體上的lac操縱子區(qū)域，組成型表達(dá)的lac 阻遏蛋白能降低基因的背景表達(dá)，有利于毒性蛋白的表達(dá)，沒(méi)有λ前噬菌體序列，具有抗T1噬菌體感染特點(diǎn)。Shuffle T7-K12感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率大于10⁶ cfu/μg DNA。

 Shuffle T7-K12 感受態(tài)細(xì)胞基因型： F′lac, pro, lacIQ / r (ara-leu)7697 araD139 fhuA2 lacZ::T7 gene1 r(phoA) PvuII phoR ahpC* galE (or U) galK λatt::pNEB3-r1-cDsbC (Spec^R, lacIq) rtrxB rpsL150(Str^R) rgor r (malF)3

菌株抗性：對(duì)氨芐青霉素，氯霉素，卡那霉素和四環(huán)素敏感，對(duì)鏈霉素和壯觀霉素抗性。

儲(chǔ)存條件：-70℃保存，避免反復(fù)凍融。

 Shuffle T7-K12 感受態(tài)細(xì)胞?操作說(shuō)明:

1.  取100μl冰上融化的AngYuBio Rosetta(DE3)感受態(tài)細(xì)胞，加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

1.  向離心管中加入700μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基（2YT或LB），混勻后37℃，200rpm復(fù)蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT 或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。