一、細胞基本屬性 | ||||
細胞名稱 | 大鼠脈絡膜微血管內皮細胞 | |||
種屬來源 | 大鼠 | |||
組織來源 | 眼 | |||
生長特性 | 貼壁生長 | |||
形態特征 | 內皮細胞樣 | |||
質量檢測 | CD34、CD31免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等 | |||
產品規格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 | |||
培養基 | 大鼠脈絡膜微血管內皮細胞專用培養基 | |||
培養條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ | |||
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | |||
消化液 | 0.25% | |||
產品貨期 | 4周左右 | |||
運輸方式 | T25培養瓶/順豐快遞(包郵) | |||
供應限制 | 于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 | |||
背景介紹 | 大鼠脈絡膜微血管內皮細胞采用膠原酶-混合消化法結合密度梯度離心法、最后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來。脈絡膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)已成為眼科學領域的研究熱點之一,目前多數體外研究應用的是人臍靜脈內皮細胞或主動脈內皮細胞等容易得到的大血管內皮細胞。由于血管內皮細胞具有器官特異性和組織特異性,用大血管內皮細胞的研究結果很難客觀、準確地解釋CNV的發生機制。因此,建立脈絡膜微血管內皮細胞(choroidal microvascular endothelial cells,CEC)體外培養體系,對深入研究CNV相關疾病具有十分重要的價值。 | |||
二、細胞培養操作 | ||||
收貨處理 | 取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態 | |||
傳代密度 | 細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養 | |||
傳代代數 | 可傳2-3代,建議收到細胞后盡快進行相關實驗 | |||
傳代比例 | 傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 | |||
傳代方法 | 1.吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次; 2.添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養基終止消化; 3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養; 4.待細胞貼壁后,培養觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養基。 | |||
備注:由于實驗所用試劑、操作環境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考 客戶在細胞培養過程中,有任何技術問題可以技術服務電話: 按 2,我們隨時給予解答。 | ||||
三、注意事項 | ||||
重要提醒 | 1.培養基于4℃條件下可保存3-6個月。 2.在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。 3.傳代培養過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。 4.運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的培養基來培養細胞。 | |||
到貨須知 | 1.收到細胞后,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,干冰運輸的細胞檢查干冰是否揮發,細胞是否解凍,若有上述現象發生請及時和我們聯系。 2.靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),記錄細胞狀態 (所拍照片將作為后續服務依據);建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長狀態。 3.由于運輸的原因,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現象。個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。 4.仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。 | |||
四、售后服務 | ||||
重發標準 | 1.細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養液嚴重漏液等,重發; 2.收到細胞未開封,如出現污染狀況,重發; 3.收到細胞3天內,發現污染問題,經核實后,重發; 4.常溫發貨的細胞靜置 2 小時后,絕大多數細胞未存活,經核實后,重發; 5.常溫發貨的細胞靜置 22 小時并且未開封,出現污染,經核實后,重發; 6.細胞活性問題,請在收到產品 3 天內給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經核實后,重發; 7.視具體情況而定。 | |||
不予重發 | 1.客戶操作造成細胞污染,不重發; 2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態不好,不重發; 3.非我們推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; 4.細胞狀態不好,未提供真實清晰的培養前 3 天的細胞狀態照片,不重發; 5.細胞培養時經其它處理導致細胞出現問題的,不重發; 6.收到細胞發現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發; 7.視具體情況而定。 |