詳細介紹
一、細胞特性
- 細胞名稱:3T6-Swiss albino細胞(小鼠胚胎成纖維細胞)
- 形態:成纖維細胞樣,貼壁生長
- 含量:>1x106 個/瓶
- 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
- 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
二、細胞接收后的處理:
1、貼壁細胞
- 收到T25方瓶細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們(凍存管細胞收到后直接37℃水浴復蘇或直接放置于液氮中長期儲存)。
- 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
- 棄去T25瓶中的培養基,換用新鮮的*培養基。
- 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。
- 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。
2、懸浮細胞
- 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。
- 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將15ml離心管置于37℃培養約2-3h。
- 1200rpm離心5min,棄去15ml離心管中的培養基,細胞沉淀用新鮮的*培養基重懸并培養。
- 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。
- 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。
本公司的細胞培養操作規程,供參考
一、3T6-Swiss albino細胞培養基及培養凍存條件準備:
- 準備H-DMEM培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
- 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
- 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
- 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
- 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化2-3分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。
- 輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1200RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加入1mL培養液后吹勻。
- 移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,先要消化處理并進行細胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行,后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數后離心,用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
注意事項:
1. 收到凍存管細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
3. 細胞用途:僅供科研使用。
發貨方式:
復蘇后發貨:我們復蘇細胞后發貨,貨期一周左右,免運費。(氣溫較好建議復蘇后發貨)
凍存發貨(干冰運輸):需額外增加干冰運費,選擇干冰運輸的我們發兩管細胞,為了保證客戶接種可靠性多發一管。(氣溫低于0℃須凍存發貨)
細胞發貨采取專業的運輸包裝,并選擇快捷的運輸方式(順豐速運或其他空運快遞)
本公司細胞引種來源:ATCC、DSMZ、ECACC、武大細胞庫、上海生化細胞所、中國科學院典型培養物保藏委員會等。