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關于兒茶酚胺

嗜鉻細胞瘤（Pheochromocytoma）是一種罕見疾病，每10萬人中的年診斷率為1~2例。嗜鉻細胞瘤會引起兒茶酚胺的分泌增加，其血漿濃度測定可為臨床高血壓診治和嗜鉻細胞瘤診斷定位提供有力數(shù)據(jù)支撐。當它的含量發(fā)生顯著變化時，就代表人體出現(xiàn)了病態(tài)。

隨著分析科學的蓬勃發(fā)展，人們對兒茶酚胺的研究更加深入，目前最常見的有液相色譜法、氣相色譜法、熒光法等，由于樣本的基質(zhì)為人體血漿，成分復雜，故樣品前處理的提取和凈化尤為重要。

普敦科技對此提出相應解決方案

使用磁性固相萃取劑，搭配AUTO M32全自動提取儀，結(jié)合液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀測定血漿中的E、NE、DA、MN、NMN和3-MT。兒茶酚胺及其代謝物均為堿性強極性化合物，使用離子交換原理的WCX Plus磁性固相萃取劑進行提取和凈化。

分離純化過程

WCX Plus磁性固相萃取劑鍵合了羧酸根基團，在溶劑體系pH值中性或偏堿性條件下電離并帶負電荷，以電荷吸引作用吸附目標化合物正離子[ M ]⁺達到捕集的效果。通過調(diào)節(jié)溶劑pH值至3以下時，羧酸根飽和而處于電中性，失去電荷吸引的[ M ]⁺被洗脫至溶劑中，從而實現(xiàn)與雜質(zhì)的分離純化。

磁性固相萃取

移取對應溶劑于專用96孔板內(nèi)，并設定AUTO M32全自動提取儀方法，運行樣品進行磁性固相萃取。完成后，取洗脫液注入LC-MS/MS測試。

實驗結(jié)論

取某正常人血漿，添加六種兒茶酚胺類目標物，兩次平行處理。所得回收率95.2-116%，相對標準偏差1.4-9.3%。

取血漿濃度為0.2ng/mL（3-MT，0.02ng/mL）標準樣品平行處理六次，內(nèi)標峰面積相對標準偏差4.4-9.7%。

六種兒茶酚胺類標準曲線線性及其準確度

綜上數(shù)據(jù)可以看出，使用WCX Plus磁性固相萃取劑，結(jié)合AUTO M32全自動提取系統(tǒng)，提取和凈化血漿中兒茶酚胺類目標物。經(jīng)LC-MS/MS分析測試，線性良好，結(jié)果準確精密，符合基本定量測試的方法學要求。

同時，大幅度減少傳統(tǒng)SPE的移液操作和人為實時監(jiān)測，節(jié)約了人力及時間成本，并顯著降低了人為因素在前處理中的影響。

AUTO M32全自動提取儀