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賽爾瑞成(Cellregen)技術(shù)團隊常年從事大腸桿菌原核表達重組蛋白制備工作,從而積累了pET系列、pGEX系列、pMAL系列等多種原核表達載體。同時,在這些常規(guī)表達載體的基礎(chǔ)上,還自主優(yōu)化構(gòu)建了一系列的特色載體,使其分別具有提供表達量、促進分泌表達、促進可溶表達、促進二硫鍵形成等特征。
那么,到底如何來選擇適合的表達載體呢?可參考下表:
載體名稱 | 啟動子 | 信號肽 | N-末端標(biāo)簽 | C-末端標(biāo)簽 | 蛋白酶切點 | 抗性 | 載體大小 | 載體特點 |
pET21a(+) | T7 |
| T7 tag | His6 tag |
| 氨芐 霉素 | 5 443bp | 強啟動子,表達量高 |
T7 |
| His6 tag- T7 tag | His6 tag | Thrombin | 卡那 霉素 | 5369bp | 強啟動子,表達量高 | |
pET30a(+) | T7 |
| His6 tag- S tag | His6 tag | Thrombin , Enterokinase | 卡那 霉素 | 5422bp | 強啟動子,表達量高 |
pET32a(+) | T7 |
| His6 tag- S tag | Thioredoxin |
| 氨芐 霉素 | 5896bp | 強啟動子,表達量高,能促進外源蛋白表達 |
pGEX-4T-1 | tac |
| GST tag |
| Thrombin | 氨芐 霉素 | 4969bp | 促進外源蛋白表達 |
pGEX-6p-1 | tac |
| GST tag |
| HRV 3C | 氨芐 霉素 | 4.9kb | 促進外源蛋白表達 |
pRSETA | T7 |
| His6 tag- T7 leader tag |
| Enterokinase | 氨芐 霉素 | 2897bp | 強啟動子,表達量高 |
pMAL-c2x | tac |
| MBP tag |
|
| 氨芐 霉素 | 6646bp | MBP具有非常強的促進外源蛋白可溶表達的能力 |
pMAL-p2x | tac | MBP 信號肽 | MBP tag |
|
| 氨芐 霉素 | 6721bp | MBP具有非常強的促進外源蛋白可溶表達的能力 |
pTWIN1 | P1 |
| Bacillus circulans chiA | Mycobacterium xenopi gyrA |
| 氨芐 霉素 | 7375bp | 含蛋白內(nèi)含子 |
pTWIN2 | P1 |
|
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| 氨芐 霉素 | 7192bp | 含蛋白內(nèi)含子 |
pBADk | ara |
|
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| 卡那 霉素 | 5435bp | 阿拉伯糖誘導(dǎo)表達,表達控制嚴緊,本底低 |
pCLDC | cspA |
|
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| 氨芐 霉素 | 4377bp | 低溫誘導(dǎo)啟動子表達,不需要添加化學(xué)誘導(dǎo)劑 |
pTK28 |
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| His6 tag- T7 tag | His6 tag | Thrombin | 卡那 霉素 | 5414bp | 中等強度啟動子,普通大腸桿菌即可高表達 |
pDHG | tac |
| GST tag | His6 tag | Factor Xa | 氨芐 霉素 | 5044bp | 雙純化標(biāo)簽,能促進外源蛋白表達 |
pSE | T7 |
| SUMO tag | His6 tag |
| 氨芐 霉素 | 5710bp | 能促進外源蛋白表達,標(biāo)簽可切除,不留多余氨基酸殘基 |
pSTP | T7 | 腸毒素 信號肽 |
| His6 tag |
| 氨芐 霉素 | 5475bp | 分泌表達,效率較高 |
pLTP | lac | 腸毒素 信號肽 |
| His6 tag |
| 氨芐 霉素 | 5524bp | 分泌表達,效率較高。弱啟動子更有利于某些蛋白分泌 |
pTP | T7 | 腸毒素 信號肽 |
| His6 tag |
| 卡那 霉素 | 5326bp | 分泌表達,效率較高 |
pAS | lac | DsbA 信號肽 |
| His6 tag |
| 氨芐 霉素 | 5513bp | 分泌表達,效率較高。弱啟動子更有利于某些蛋白分泌 |
pPS | lac | pelB 信號肽 |
| His6 tag- c-myc tag |
| 氨芐 霉素 | 3339bp | 分泌表達。弱啟動子更有利于某些蛋白分泌 |
pTS | tac | S. oneidensis TorA 信號肽 |
| c-myc tag- His6 tag |
| 氨芐 霉素 | 5583bp | 分泌表達,效率較高 |
pES | tac | E. coli TorA 信號肽 |
| c-myc tag- His6 tag |
| 氨芐 霉素 | 5616bp | 分泌表達,效率較高 |
pSC | T7 | DsbC 信號肽 | DsbC tag | His6 tag | Thrombin | 卡那 霉素 | 6001bp | 含分子伴侶蛋白,促進外源蛋白正確折疊,表達 |
pSG | T7 | DsbG 信號肽 | DsbG tag | His6 tag | Thrombin | 卡那 霉素 | 6025bp | 含分子伴侶蛋白,促進外源蛋白正確折疊,表達 |
pSF | T7 | FkpA 信號肽 | FkpA tag | His6 tag | Thrombin | 卡那 霉素 | 6091bp | 含分子伴侶蛋白,促進外源蛋白正確折疊,表達 |
pEFC | T7 | 腸毒素 信號肽 |
| c-myc tag, FkpA tag |
| 卡那 霉素 | 6 215bp | 含分子伴侶蛋白,促進外源蛋白正確折疊,表達 |
賽爾瑞成系列表達載體圖譜, 可參看產(chǎn)品詳細介紹
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