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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 貨號 | 61FG2XLB |
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產品介紹
產品參數
| 產品貨號 | 產品名稱 | 規格 |
| 61FG2XLB | HTRF MAB ANTI FLAG M2-XL665 | 20K PTS |
單克隆抗體 Anti FLAG M2 - XL665 是一種針對用 XL665 標記的 FLAG® 融合蛋白產生的 IgG1 抗體。與抗 FLAG®M1 抗體不同，M2 抗體將識別 FLAG® 融合蛋白 N 端或 C 端的 FLAG® 序列。
該試劑可用于生化和細胞兩種形式，以研究各種相互作用：蛋白質 / 蛋白質、蛋白質 / 肽、蛋白質 / DNA、蛋白質 / RNA、蛋白質 / 碳水化合物、蛋白質 / 小分子、受體 / 配體。
HTRF 可以檢測從皮摩爾到低毫摩爾的廣泛親和力常數范圍。
產品特點
檢測原理：在 HTRF 相互作用檢測中，一個部分（直接或間接）用供體標記，另一部分用受體標記（同樣直接或間接）。信號強度與兩部分的結合成正比。在此處所示的例子中：單克隆抗體 Anti FLAG M2 - XL665 與帶 FLAG M2 標簽的A部分結合，而B 部分* 與用 HTRF 供體標記的特異性抗體結合。 B部分*也可以是化的、帶標簽的、Fc 融合的。在這些情況下，使用相應的用供體標記的 HTRF 試劑（抗標簽、抗物種、蛋白 A、鏈霉親和素）進行檢測。
檢測方案：右側的例子描述了使用 20µL 最終檢測體積來檢測帶 FLAG M2 標簽的A部分和未帶標簽的B部分* 之間相互作用的方案。分配兩個部分（10µL），孵育，加入單克隆抗體 Anti FLAG M2 - XL665（5µL）和用供體標記的抗B部分（5µL），孵育并讀取。* B部分也可以是化的、帶標簽的、Fc 融合的或直接標記的。在這些情況下，使用相應的用供體標記的 HTRF 試劑（抗標簽、抗物種、蛋白 A、鏈霉親和素）進行檢測。
檢測細節：
為特定應用構建 HTRF 相互作用檢測：試劑按測試次數（20µL 反應）出售。與 XL665 或 d2 偶聯的抗體以每孔 20ng 抗體的量供應。還提供每瓶中的活性部分量（以及每瓶中的示蹤劑數量 - 見產品說明表）。活性部分定義為結合物（例如抗體）的活性部分。
測試次數與活性部分的關系：每孔的平均結合物數量反映了總體生物材料含量。通常優選使用活性部分的量而不是總結合物的量。對于穴狀化合物和 d2 結合物，總結合物的量等于活性部分的量，因為標記的分子量可以忽略不計。對于用 XL665 標記的實體，總結合物的量將根據 XL665 結合物的最終摩爾比而變化，然而，Revvity 提供的活性部分的量是恒定的，并且基于訂購的測試次數。
標記 / 物種抗體活性部分 / 5000 次測試物種和亞型特異性 FLAG® 單克隆抗體 M2 5 - 10µg 小鼠 IgG1 DYKDDDDK 肽。
推薦的穴狀化合物和 XL665 結合物的量：穴狀化合物結合物不能過量，以防止讀數器飽和和不可接受的背景水平。在大多數情況下，1 到 5nM 的穴狀化合物濃度是合適的，并且根據所使用的與 HTRF 兼容的讀數器，在 620nm 處將產生 20000 到 80000 cps。XL665 結合物必須盡可能與其檢測對應物匹配，以便最大數量的生物分子被 XL665 受體標記。因此，要檢測濃度為 20nM 的帶標簽分子，抗標簽 - XL665 的濃度應是等摩爾或更高。
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