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供貨周期 | 現貨 | 貨號 | 64RBS807 |
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產品貨號 | 產品名稱 | 規格 |
64ERKPEG | HTRF ERK P-T202/Y204 KIT | 500 PTS |
64ERKPEH | HTRF ERK P-T202/Y204 KIT | 10K PTS |
磷酸化 ERK 檢測試劑盒旨在用于在 Thr202/Tyr204 位點磷酸化的 ERK的定量檢測,作為 GPCR(G 蛋白偶聯受體)和 RTK(受體激酶)靶向篩選的 MAPK(絲裂原活化蛋白激酶)通路讀出指標。簡單的混合后可進行直接讀取,省去了所有洗滌步驟,以實現更快的分析和高質量的輸出。
產品特點
工作原理:
磷酸化 ERK(Thr202/Tyr204)檢測原理
磷酸化 ERK(Thr202/Tyr204)檢測用于測量在 Thr202/Tyr204 位點磷酸化的 ERK。與蛋白質印跡法不同,該檢測基于微孔板,不需要凝膠、電泳或轉膜。磷酸化 ERK(Thr202/Tyr204)檢測使用兩種標記抗體,一種帶有供體熒光團,另一種帶有受體。第一種抗體因其對蛋白質上磷酸化基序的特異性結合而被選擇,第二種抗體因其能夠識別不依賴于其磷酸化狀態的蛋白質而被選擇。蛋白質磷酸化使得涉及兩種標記抗體的免疫復合物形成,這使供體熒光團與受體緊密接近,從而產生熒光共振能量轉移(FRET)信號。其強度與樣品中存在的磷酸化蛋白的濃度直接成正比,并在無需洗滌的檢測形式下提供了一種評估蛋白質磷酸化狀態的方法。
磷酸化 ERK 雙板檢測方案:
雙板方案涉及在 96 孔板中培養細胞,然后進行裂解,接著將裂解物轉移到 384 孔低體積檢測板中,之后加入磷酸化 ERK HTRF 檢測試劑。該方案能夠監測細胞的活力和融合度。
磷酸化 ERK 單板檢測方案:
使用 HTRF 試劑檢測磷酸化 ERK 可以在一個用于培養、刺激和裂解的單板上進行。無需洗滌步驟。這個為高通量篩選設計的方案能夠實現微型化,同時保持強大的 HTRF 質量。
簡化的通路:
MAPK/ERK 細胞信號通路
MAPK/ERK 信號級聯由參與生長和分化的多種受體激活。核心信號轉導級聯引發對眾多細胞過程的調節,包括黏附、遷移、凋亡、分化和代謝。MEK1/2 在 Tyr204 和 Thr202 位點催化 ERK1/2 的磷酸化。作為響應,ERK 磷酸化數百種細胞質和細胞核底物。MAPK 信號的廣泛復雜性和多樣性使 ERK 成為生物學中的關鍵調節因子和主要信號節點。