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人骨髓造血干細胞

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更新時間:2023-04-21 16:51:59瀏覽次數:470

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 骨髓組織
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詳細介紹

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產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人骨髓造血干細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

骨髓組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。造血干細胞具有自我更新能力并能分化為各種血細胞的前提細胞,終生成各種血細胞成分,包括紅細胞,白細胞和血小板。造血干細胞需要根據機體的生理需求適時的補充血液系統各個成熟細胞組分。同時在損傷、炎癥等應激狀態下,造血干細胞也扮演著調節和維持體內血液系統各個細胞組分的生理平衡的角色。臨床治療中,造血干細胞移植廣泛應用于血液系統疾病以及自身免疫疾病,在其它實體瘤的治療中,比如淋巴瘤,生殖細胞瘤,乳腺癌,小細胞肺癌,主要應用于常規治療失敗或復發難治以及具有不良預后因素的患者。造血干細胞以不對稱有絲分裂方式進行增殖,一個干細胞分裂產生兩個子細胞,一個分化為造血祖細胞,另一個則保持干細胞特征。造血干細胞在不斷體外培養產生大量造血祖細胞同時,保持自己既不增殖也不分化。體外培養微環境合適,造血干細胞可持續維持培養 60 天左右。 造血干細胞體外增殖培養需要基質細胞滋養(滋養層細胞),缺少滋養層細胞不增殖,無法長期培養,本產品為收集培養好的造血干懸浮細胞灌裝發貨,不包含滋養層,因此收貨后建議盡快實驗。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合培養基篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經CD34免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、SCF、IL-3、TPO、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  懸浮

細胞形態  圓形

傳代特性  不建議傳代

消化液  

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

脫氫激亞型2抗體 皮膚T細胞淋巴瘤相關抗原5封閉多肽 

促腎上腺皮質激釋放因子/促腎上皮質激釋放激抗體 SYF2蛋白封閉多肽 

D型多巴色脫羧抗體 突觸相關蛋白23封閉多肽 

CD10單克隆抗體 9號染色體開放閱讀框66封閉多肽 

二酰基甘油酰基轉移2樣蛋白6抗體 組胺雞卵白蛋白偶聯物 

促甲狀腺受體抗體(C端) 乙酰基轉移10封閉多肽 

核自身抗原SP140抗體 原癌基因AF4蛋白封閉多肽 

SAPS結構域家族3抗體 酪氨羥化封閉多肽 

鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體 RNA結合蛋白35A封閉多肽 

ADP核糖基化因子GTP激活蛋白1抗體 過氧化物體生成蛋白5相關蛋白封閉多肽 

Cy3標記小鼠抗人CD8單克隆抗體 延胡索酰乙酰乙水解封閉多肽 

還原型輔Ⅱ氧化5/腺嘌呤二核苷磷抗體 軸突蛋白5封閉多肽 

舞蹈癥相關蛋白40/8相關蛋白/第八因子相關蛋白抗體 重組小鼠FcRn蛋白 

早老蛋白-1抗體 卵泡刺激結合蛋白1封閉多肽 

eIF4H蛋白抗體 解旋樣轉錄因子封閉多肽 

乳腺癌易感基因1抗體 富含亮氨重復蛋白48封閉多肽 

退行性精母細胞同源物1抗體 MAGOH蛋白封閉多肽 

DEK癌基因結合蛋白 基質金屬-26封閉多肽 
人骨髓造血干細胞GMEM (Glasgows MEM)500mL-

Ham's F-12500mL-

Ham's F-12K(不含L-)500mL-

小鼠子宮成纖維細胞培養基100mL小鼠子宮成纖維細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠子宮成纖維細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠子宮成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠子宮成纖維細胞的體外培養。

SW579 [SW 579; SW-579]細胞專用培養基(DMEM)125mL×4SW579 [SW 579; SW-579]細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持SW579 [SW 579; SW-579]細胞佳的生長狀態。本產品中已包含SW579 [SW 579; SW-579]細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SW579 [SW 579; SW-579]細胞的體外培養。

大鼠睪丸支持細胞培養基100mL大鼠睪丸支持細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠睪丸支持細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠睪丸支持細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠睪丸支持細胞的體外培養。

22RV1細胞專用培養基125mL×422RV1細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持22RV1細胞佳的生長狀態。本產品中已包含22RV1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于22RV1細胞的體外培養。


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