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小鼠脊髓微血管內皮細胞

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更新時間:2023-04-21 16:50:39瀏覽次數:160

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 脊髓組織
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詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自脊髓組織;脊髓是細細的管束狀的神經結構,位于脊柱的椎管內且被脊椎保護;是源自腦的中樞神經系統延伸部分。中樞神經系統的細胞依靠復雜的聯系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經信息。人和脊椎動物中樞神經系統的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發出成對的神經,分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H形(蝴蝶型)灰質區,主要由神經細胞構成;在灰質區周圍為白質區,主要由有髓神經纖維組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發出許多成對的神經(稱為脊神經)分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。微血管又稱毛細血管。分布于各種組織和細胞間的微細的血管。介于微動脈和微靜脈之間。平均直徑7~9微米,數量極多,成網狀分布。管壁由一層內皮細胞及一薄層基膜組成,厚約0.5微米。基膜外面有薄層結締組織,其中有纖維細胞、巨噬細胞和周細胞等。細的毛細血管由一個內皮細胞圍成管腔,較粗的毛細血管由2~3個內皮細胞圍成。分布于肌肉組織、神經組織和結締組織中的毛細血管,內皮細胞間為縫隙連接(縫隙寬150埃),稱連續毛細血管;分布于內分泌腺、腎臟等處的毛細血管,除有縫隙連接外,細胞本身有許多小孔,(孔徑800~1000埃),稱有孔毛細血管;分布于肝、脾、骨髓及某些內分泌腺的毛細血管,管腔擴大,稱血竇。毛細血管的管壁薄、通透性大、管徑細(8~10微米)、數量多、血流速度慢,這些特點使其成為血液與組織液進行物質交換的場所,又稱交換血管。血竇(sinusoid)由毛細血管管腔擴大而成,竇壁的一般結構與毛細血管壁相同,由單層內皮細胞構成,內皮細胞膜上有窗孔。不同器官的竇壁結構各有差別。脾血竇的內皮細胞間有較寬裂隙;肝血竇內皮細胞是不連續的,有較寬的細胞隙(0.1~0.5微米);肝、脾血竇的基膜不完整或無基膜,通透性比毛細血管大,較大的蛋白質和血細胞可以通過。肝血竇壁內有枯否細胞,脾血竇內外有巨噬細胞,這兩種細胞都有吞噬能力,可吞噬清除血液中的異物、細菌等有害物質,是機體單核巨噬細胞系統的重要組成分。某些內分泌腺的血竇有連續的基膜。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用中性dan白 - 膠原聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  內皮細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

小鼠脊髓微血管內皮細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

脊髓組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

ABI基因家族2抗體 磷化細胞信號轉導分子SMAD5封閉多肽 

Ki-67單克隆抗體 真核翻譯起始因子1封閉多肽 

抑制細胞凋亡樣蛋白2抗體 環指蛋白23封閉多肽 

組蛋白去乙酰化1抗體 G蛋白偶聯受體115封閉多肽 

異戊酰脫氫抗體 HEAT重復內含蛋白8蛋白封閉多肽 

MAGEG1抗體 絡絲蛋白封閉多肽 

基質金屬11抗體 整合樣金屬與樣2蛋白封閉多肽 

生長抑制DNA損傷基因34抗體 RAS家族關聯結構域蛋白9封閉多肽 

骨形態發生抑制蛋白SOST抗體 Cy7標記的鏈霉親和 

心臟特異性絲氨抗體 組胺受體H1封閉多肽 

細胞色P450 2C19抗體 堿性磷標記鏈霉親和 

G蛋白偶合受體激1抗體 突觸泡蛋白2A封閉多肽 

PE-Cy5標記小鼠抗人CD3單克隆抗體 補體成分5受體1封閉多肽 

FosB抗體 神經干細胞樹突調節蛋白DAGLα封閉多肽 

腸道病毒71型/手足口病病毒3D抗體 癌基因c-Raf封閉多肽 

精子頂體膜相關蛋白4抗體 富含亮氨重復蛋白38封閉多肽 

間隙連接蛋白32抗體 跨膜和卷曲螺旋結構域蛋白1封閉多肽 

腫瘤壞死因子誘導蛋白3相互作用蛋白1抗體 肌細胞增強因子2B封閉多肽 
小鼠脊髓微血管內皮細胞PA317細胞專用培養基125mL×4PA317細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持PA317細胞佳的生長狀態。本產品中已包含PA317細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于PA317細胞的體外培養。

DMEM/F12(含L-丙氨酰-L-)500mL-

MEMα培養基(不含核苷,含20%FBS)125mL×4MEMα是一種改良的MEM培養基,與MEM培養基相比MEMα培養基營養更為豐富,在MEM的基礎上又添加了NEAA、鈉、硫鋅、VB12、生物、抗壞血等成分,廣泛應用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞的培養;不含核苷和脫氧核苷的MEMα培養基,常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細胞的篩選培養基。

大鼠肌腱成纖維細胞培養基100mL大鼠肌腱成纖維細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠肌腱成纖維細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠肌腱成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠肌腱成纖維細胞的體外培養。

人滑膜成纖維細胞(類風濕關節炎)培養基100mL人滑膜成纖維細胞(類風濕關節炎)培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人滑膜成纖維細胞(類風濕關節炎)佳的生長狀態。本產品中已包含人滑膜成纖維細胞(類風濕關節炎)生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人滑膜成纖維細胞(類風濕關節炎)的體外培養。本產品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

大鼠骨髓造血干細胞培養基100mL大鼠骨髓造血干細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠骨髓造血干細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠骨髓造血干細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠骨髓造血干細胞的體外培養。本產品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

人腎成纖維細胞培養基100mL人腎成纖維細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人腎成纖維細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人腎成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人腎成纖維細胞的體外培養。
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

 


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