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人腹膜毛細血管內皮細胞

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更新時間:2023-04-21 16:49:57瀏覽次數:224

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腹膜組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人腹膜毛細血管內皮細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

腹膜組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腹膜組織;腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜,主要由間皮細胞和間質(結締組織、纖維、毛細血管、淋巴管)構成,藉由結締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內的器官,能分泌黏液潤濕臟器的表面,減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、淋巴和神經組織經由腹膜與外界相連;腹膜也具有吸收撞擊保護內臟的效果。腹膜(peritoneum)為全身面積大、配布復雜的漿膜,由皮及少量結締組織構成,薄而光滑,呈半透明狀。襯于腹、盆腔壁內表面的腹膜稱為壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄層;覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續、移行,共同圍成不規則的潛在性腔隙,稱為腹膜腔(peritoneal-cavity)。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內有少量漿液,在臟器活動時可減少摩擦。腹膜的主要生理功能:①分泌功能;②吸收功能;③再生能力;④防御功能;⑤調理功能。臟、壁腹膜都有豐富的毛細血管,毛細血管上有不同的孔徑;腹膜的毛細血管和毛細血管后靜脈是進行溶質交換的主要場所。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原-中性dan白聯合消化法結合化學試劑抑制法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  內皮細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

NUDCD2蛋白抗體 LCK相互作用膜蛋白封閉多肽 

一氧化氮合轉運誘導抗體 粘結蛋白SA1封閉多肽 

細胞分化蛋白SEPT14抗體 嗅覺受體51I2封閉多肽 

頜骨成釉細胞相關蛋白抗體 FLJ38767蛋白封閉多肽 

鋅指蛋白804A抗體 磷化CD156b封閉多肽 

英文名稱: PAX8 絲裂原活化蛋白激6封閉多肽  

英文名稱: VSV-G tag 甲狀腺激轉運蛋白/單羧轉運蛋白7/8封閉多肽 

磷肌醇磷脂PLCZ1抗體 FBXO16蛋白封閉多肽 

環指蛋白21抗體 長鏈脂肪酰基水解封閉多肽 

英文名稱: ALDH1L1 絲氨/蘇氨蛋白激NEK1封閉多肽 

9號染色體開放閱讀框78抗體 DNA1樣蛋白1封閉多肽 

磷化微管相關蛋白抗體 組織K封閉多肽 

神經降壓受體2抗體 核糖體p70 S6蛋白激封閉多肽 

原鈣粘附蛋白α8抗體 T淋巴細胞CD1d封閉多肽 

磷化絲氨/蘇氨/酪氨抗體 磷化血小板源性生長因子受體α/β封閉多肽 

PE-Cy5標記小鼠CD4單克隆抗體 轉錄因子E2F8封閉多肽 

1號染色體開放閱讀框124抗體 核受體共激活因子5封閉多肽 

HOMER2抗體 磷化β 連環蛋白封閉多肽 
人腹膜毛細血管內皮細胞M199(不含酚紅,含L-丙氨酰-L-)500mL-

McCoy's 5A培養基(含10%FBS)125mL×4McCoy's 5A培養基是Thomas McCoy等人在1959年設計的培養基,初專門用于Novikoff Hepatoma細胞的培養。McCoy's 5A培養基是改良的Basal Medium 5A,與其他培養基不同的是,McCoy's 5A含有還原型、細菌蛋白胨以及高濃度的葡萄糖。McCoy's 5A廣泛用于多種類型的原代細胞的培養,如骨髓、皮膚、牙齦、腎、脾、肺、大鼠胚胎、網膜等。此外McCoy's 5A培養基還用于組織活檢培養、細胞建系,以及一些淋巴細胞和較難培養的細胞的培養。

小鼠脂肪間充質干細胞成軟骨誘導分化培養基100mL小鼠脂肪間充質干細胞成軟骨誘導分化培養基專門為小鼠脂肪間充質干細胞成軟骨誘導分化而開發,針對小鼠脂肪間充質干細胞的特性優化分化試劑的配方,可增加小鼠脂肪間充質干細胞的成軟骨分化效果。本產品不含血清成分,但含其他血清替代物蛋白成分,僅用于科研用途,不可用于診斷、治療、臨床及其他用途。培養基組成成分成分名稱添加體積(規格200ML)添加體積(規格100ML)小鼠脂肪間充質干細胞成軟骨誘導分化基礎培養基194mL97mL鈉 SodiumPyruvate200μL100μLITS添加物 ITS+supplement1mL*21mLTGF-β31mL*21mL抗壞血 AscorbicAcid600μL300μL脯氨 Proline200μL100μL Dexamethasone20μL10μL青鏈霉 Pennicillin-Streptomycin2mL1mL染色劑阿利辛藍染液                                                      10ML/5ML      注:各成分請根據試劑管上標簽標示溫度保存。

人臍靜脈血來源內皮祖細胞培養基100mL人臍靜脈血來源內皮祖細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人臍靜脈血來源內皮祖細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人臍靜脈血來源內皮祖細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人臍靜脈血來源內皮祖細胞的體外培養。

DMEM高糖(含HEPES)500mL-

Reh細胞專用培養基125mL×4Reh細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持Reh細胞佳的生長狀態。本產品中已包含Reh細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于Reh細胞的體外培養。

RS1細胞專用培養基125mL×4RS1細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持RS1細胞佳的生長狀態。本產品中已包含RS1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于RS1細胞的體外培養。

 


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