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人表皮成纖維細胞

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更新時間:2023-04-21 16:43:08瀏覽次數:144

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 皮膚組織
人表皮成纖維細胞的相關產品:兔心肌成纖維細胞原代細胞5×105兔主動脈內皮細胞原代細胞5×105兔主動脈平滑肌細胞原代細胞5×105兔主動脈外膜成纖維細胞原代細胞5×105兔冠狀動脈內皮細胞原代細胞5×105

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自皮膚組織;皮膚組織來源包括頭部、臉部、手、腳、腿、背部、腹部、包皮等體表部位皮膚,可依據需求選用;表皮位于動物皮膚的外層,由胚胎時期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結構,由復層扁平上皮構成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質層。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用先中性dan白消化、后胰dan白-膠原混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人表皮成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

皮膚組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

甘油三磷脫氫1抗體 原鈣粘蛋白γB6封閉多肽 

短鏈脫氫還原13抗體 丁酰酯 

葡萄糖醛差向異構抗體 腫瘤抑制基因ABI2/精氨酪氨蛋白激結合蛋白封閉多肽 

SPG48蛋白抗體 磷化腺苷單磷活化蛋白激α1封閉多肽 

基爾曼氏細小病毒VP1/VP2,大鼠潛在病毒KRV抗體 DENND1B蛋白封閉多肽 

富含脯氨蛋白15抗體 環指蛋白3封閉多肽 

型纖溶原激活因子抗體 C2GNT3蛋白封閉多肽 

細胞壁合成蛋白43抗體 先心病相關蛋白TBX1封閉多肽 

CD43單克隆抗體 CD4封閉多肽 

環指蛋白149抗體 細胞因子信號傳導抑制蛋白3封閉多肽 

膠質細胞系源性神經營養因子受體α1樣蛋白抗體 p21蛋白封閉多肽 

LIX1抗體 重組2 Spike S 蛋白 

葡萄糖激抗體 胰島樣生長因子結合蛋白1封閉多肽 

錨蛋白重復結構域蛋白40抗體 γ-分泌組件蛋白NCLN封閉多肽 

整合β3/CD61抗體 腫瘤異常甲基化蛋白2封閉多肽 

FAM171B蛋白抗體 膠質細胞谷氨運載蛋白2封閉多肽 

磷化分化相關基因NDRG1抗體 先天性裂手/裂足畸形相關蛋白DSS1封閉多肽 

細胞遷移誘導因子5單克隆抗體 細胞周期檢查控制蛋白質封閉多肽 
人表皮成纖維細胞UM-UC-3細胞專用培養基125mL×4UM-UC-3細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持UM-UC-3細胞佳的生長狀態。本產品中已包含UM-UC-3細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于UM-UC-3細胞的體外培養。

K562/G01細胞專用培養基125mL×4K562/G01細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持K562/G01細胞佳的生長狀態。本產品中已包含K562/G01細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于K562/G01細胞的體外培養。

HuH-6細胞專用培養基125mL×4HuH-6細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持HuH-6細胞佳的生長狀態。本產品中已包含HuH-6細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HuH-6細胞的體外培養。

Eca-109細胞專用培養基125mL×4Eca-109細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持Eca-109細胞佳的生長狀態。本產品中已包含Eca-109細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于Eca-109細胞的體外培養。

小鼠支氣管平滑肌細胞培養基100mL小鼠支氣管平滑肌細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠支氣管平滑肌細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠支氣管平滑肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠支氣管平滑肌細胞的體外培養。

大鼠口腔上皮細胞培養基100mL大鼠口腔上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠口腔上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠口腔上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠口腔上皮細胞的體外培養。

Ham's F-10(不含L-)500mL-
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

 


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