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大鼠脈絡膜血管內皮細胞

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更新時間:2023-04-23 11:01:21瀏覽次數:270

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 脈絡膜組織
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詳細介紹

1.png

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠脈絡膜血管內皮細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

脈絡膜組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自眼球脈絡膜組織;脈絡膜在視網膜和鞏膜之間,含有豐富血管和色素細胞,對外力沖擊的耐受性較視網膜差,當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時,堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用,使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色,圍繞視神經乳頭部有照膜,為青綠色帶金屬光澤的三角形區。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜,由纖維組織、小血管和毛細血管組成,軟而薄,棕紅色,在鞏膜和視網膜之間,續連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環營養視網膜外層,其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養視網膜外層及玻璃體,并有遮光作用,使反射的物象清楚。同時對視覺系統起保護作用,對整個視覺神經有調節作用。續連于睫狀體后方,含豐富的血管和色素細胞,有營養和遮光作用。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原-中性dan白混合消化法并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  內皮細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

軸絲動力蛋白1抗體 皮卡丘封閉多肽 

C端結合蛋白1抗體 配對盒基因7封閉多肽 

26S體非ATP調節亞基11抗體 胞漿5'核苷1B封閉多肽 

血小板內皮細胞黏附分子-1抗體 RAS家族關聯結構域蛋白6封閉多肽 

腺苷單磷活化蛋白激α2抗體 二酰基甘油脂肪β/DAGLβ 封閉多肽  

磷化白細胞介-10受體a抗體 DIMT1L蛋白封閉多肽 

7號染色體開放閱讀框43抗體 感覺神經性耳聾常染色體隱性遺傳61封閉多肽 

辣椒受體5抗體 胰脂肪相關蛋白2封閉多肽 

MS4A15蛋白抗體 Rho的核苷交換因子12封閉多肽 

促卵泡刺激受體抗體 子宮內膜封閉多肽 

成纖維細胞生長因子受體4單克隆抗體 細胞死亡防衛蛋白1封閉多肽 

肌動蛋白結合蛋白CFL抗體 T淋巴細胞分化蛋白MAL2封閉多肽 

神經元膜糖蛋白錨定蛋白2抗體 14號染色體開放閱框35封閉多肽 

眼睛發育缺失蛋白EYA2抗體 酮基移換樣蛋白1封閉多肽 

乙醇脫氫1抗體 磷化粘著斑激封閉多肽 

英文名稱: Trk A + B + C 2號染色體開放閱讀框6封閉多肽 

黑色瘤相關抗原3抗體 蝮蛇蛇毒蛋白封閉多肽 

絲裂原活化蛋白激1/2單克隆抗體 KHSRP蛋白封閉多肽 
大鼠脈絡膜血管內皮細胞NCI-H520 (人肺鱗癌細胞) (STR鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶

小鼠胰腺腺泡細胞5×10?Cells/T25培養瓶

小鼠視網膜Muller細胞5×10?Cells/T25培養瓶

人骨髓來源巨噬細胞5×10?Cells/T25培養瓶

兔肺微血管內皮細胞5×10?Cells/T25培養瓶

人宮頸癌成纖維細胞5×10?Cells/T25培養瓶

大鼠心肌細胞5×10?Cells/T25培養瓶


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