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小鼠肺成纖維細胞

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更新時間:2023-04-21 15:02:48瀏覽次數:254

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肺組織
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詳細介紹

1.png

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

小鼠肺成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

肺組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的肺成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構造和維持肺器官的正常形態,合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3-5代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

松弛3抗體 磷化白細胞介3受體β封閉多肽 小鼠垂體腺苷環化激活肽(PACAP) ELISA檢測試劑盒

三磷肌醇3激B抗體 磷化細胞分裂周期蛋白16封閉多肽 小鼠血管緊張轉化(ACE) ELISA Kit

N6AMT2蛋白抗體 雙特異性蛋白磷7封閉多肽 小鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ) ELISA試劑盒

電壓門控鉀通道Kv8.2抗體 2號染色體開放閱讀框47封閉多肽 小鼠角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR) 試劑盒 ELISA

突觸融合蛋白6單克隆抗體 微管蛋白β3封閉多肽 小鼠活化A(ACV-A) ELISA檢測試劑盒

磷化蛋白激C結合蛋白2抗體 載脂蛋白C3封閉多肽 小鼠腦源性神經營養因子(BDNF) ELISA Kit

磷鈉協同轉運蛋白抗體 尿轉運型糖蛋白A2封閉多肽 小鼠骨成型蛋白2(BMP-2) ELISA試劑盒

混合系列蛋白激樣結構域單克隆抗體 鋅指蛋白496封閉多肽 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4) 試劑盒 ELISA

C型凝集結構域家族9成員A抗體 視覺抑制蛋白封閉多肽 小鼠胰島樣生長因子結合蛋白6(IGFBP-6) ELISA檢測試劑盒

電壓門控鉀通道亞基Kv7.4抗體 胰島樣生長因子結合蛋白7封閉多肽 小鼠巨噬細胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15) ELISA Kit

DNA結合抑制因子2抗體 血紅蛋白α1/α-Globin封閉多肽 小鼠肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18) ELISA試劑盒

短鏈脫氫/還原SDRO抗體 FMS樣酪氨激3配體封閉多肽 小鼠(LZM) 試劑盒 ELISA

英文名稱: Azurocidin/HBP 生物蛋白連接封閉多肽 小鼠可溶性CD30(sCD30) ELISA檢測試劑盒

親脂性蛋白B抗體 跨膜蛋白166封閉多肽 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2) ELISA Kit

干擾-γ/IFN-γ抗體 環指蛋白61封閉多肽 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1) ELISA試劑盒

軸絲動力蛋白8抗體 白介1α封閉多肽 小鼠粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)  試劑盒 ELISA

自然殺傷細胞親環相關蛋白抗體 組蛋白結合蛋白RBBP7封閉多肽 小鼠血管緊張轉化(ACE)ELISA檢測試劑盒

核小體組裝蛋白1樣蛋白5抗體 NXP20蛋白封閉多肽 小鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA Kit
小鼠肺成纖維細胞小鼠髓核細胞英文名稱:小鼠髓核細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠破骨細胞英文名稱:小鼠破骨細胞5×105提供化學染色報告

小鼠皮膚成纖維細胞英文名稱:小鼠皮膚成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠角質形成細胞英文名稱:小鼠角質形成細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠表皮干細胞英文名稱:小鼠表皮干細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠前脂肪細胞英文名稱:小鼠前脂肪細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠脂肪微血管內皮細胞英文名稱:小鼠脂肪微血管內皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告


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