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小鼠腦成纖維細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 腦組織
小鼠腦成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML人淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML人主動(dòng)脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML人主動(dòng)脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML人睪丸支持細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自腦組織;大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái);成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的腦成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開(kāi)始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠腦成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腦組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

BCL2相互作用蛋白質(zhì)抗體 嗅覺(jué)受體5M11封閉多肽 小鼠紅細(xì)胞生成(EPO)ELISA檢測(cè)試劑盒

單核巨噬細(xì)胞分化相關(guān)蛋白2抗體 二胺乙酰基轉(zhuǎn)移1封閉多肽 小鼠E選擇(E-Selectin/CD62E) ELISA Kit

英文名稱: streptomycin 磷化腫瘤抑制基因P53封閉多肽 小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒

英文名稱: Fatty Acid Synthase 磷化蛋白磷激PKC/CPI-17封閉多肽 小鼠Slit2  試劑盒 ELISA

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28B抗體 磷化胞吞再循環(huán)相關(guān)銜接蛋白CENTB1封閉多肽 小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42) ELISA檢測(cè)試劑盒

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子11抗體 同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN2封閉多肽 小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG) ELISA Kit

平滑肌細(xì)胞相關(guān)蛋白4抗體 鋅指蛋白738封閉多肽 小鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra) ELISA試劑盒

FAM189A1蛋白抗體 蝶呤甲醇胺脫水1封閉多肽 小鼠降鈣原(PCT) 試劑盒 ELISA

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框64抗體 微管相關(guān)絲氨/蘇氨激1封閉多肽 小鼠胰島自身抗體(IAA)ELISA檢測(cè)試劑盒

同源盒蛋白C11抗體 胎盤(pán)特異蛋白1封閉多肽 小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210) ELISA Kit

SKIP蛋白抗體 角蛋白相關(guān)蛋白10-2封閉多肽 小鼠白介7(IL-7) ELISA試劑盒

甲基化CpG結(jié)合蛋白MBD6抗體 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP α 封閉多肽 小鼠褪黑(MT) 試劑盒 ELISA

磷酯3蛋白抗體 DNAJC21蛋白封閉多肽 小鼠載脂蛋白H(Apo-H) ELISA檢測(cè)試劑盒

親環(huán)蛋白PPIB抗體 膜相關(guān)蛋白樣蛋白NUMBL封閉多肽 小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA Kit

溶質(zhì)載體家族22成員10抗體 重組2核衣殼蛋白 小鼠血小板因子3(PF-3) ELISA試劑盒

白介6單克隆抗體 轉(zhuǎn)甲狀腺蛋白/前白蛋白封閉多肽 小鼠白介2受體(IL-2R) 試劑盒 ELISA

CD44抗體 SBDS蛋白封閉多肽 小鼠腎上腺髓質(zhì)(ADM) ELISA檢測(cè)試劑盒

同源盒蛋白GSC抗體 羅丹明標(biāo)記 小鼠可溶性瘦受體(sLR) ELISA Kit
小鼠腦成纖維細(xì)胞小鼠膈肌細(xì)胞英文名稱:小鼠膈肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠肌腱成纖維細(xì)胞英文名稱:小鼠肌腱成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠皮下微血管內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:小鼠皮下微血管內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠脂肪細(xì)胞英文名稱:小鼠脂肪細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠椎體終板軟骨細(xì)胞英文名稱:小鼠椎體終板軟骨細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:小鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠耳軟骨細(xì)胞英文名稱:小鼠耳軟骨細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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