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大鼠主動脈平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-23 08:40:19瀏覽次數:245

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 主動脈組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠主動脈平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

主動脈組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自主動脈組織;主動脈是體循環的動脈主干。其運行路徑為:升主動脈起于左心室,至右側第2胸肋關節高度移行為主動脈弓,弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈;在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈,以上為胸主動脈,至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動脈;髂總動脈在骶髂關節高度分為髂內、外動脈。主動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。主動脈平滑肌細胞在心血管疾病發生、發展中具有重要作用,以主動脈平滑肌細胞為實驗研究對象,探討心血管疾病相關發病機制是目前研究的熱點;體外培養的主動脈平滑肌細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

黑色瘤相關抗原8抗體 轉運蛋白SEC61β亞基封閉多肽 

肌細胞生成抗體 磷脂patatin樣域包含蛋白8封閉多肽 

神經母細胞瘤蛋白PHOX2B抗體 磷化腫瘤抑制基因LATS1/LATS2封閉多肽 

甲基固醇羥化單加氧1抗體 生長因子受體結合蛋白2相關蛋白4封閉多肽 

β2-微球蛋白單克隆抗體 神經肽Y1受體封閉多肽 

磷化蓬亂蛋白2抗體 EXOC1蛋白封閉多肽 

生長因子受體結合適應蛋白抗體 NFAM1封閉多肽 

胞內接頭蛋白P14抗體 肌動蛋白結合蛋白2A封閉多肽 

1號染色體開放閱讀框67抗體 8號染色體開放閱讀框K29封閉多肽 

卵泡刺激結合蛋白1抗體 成蛋白相關蛋白1封閉多肽 

英文名稱: Caspase-9 LEPREL1蛋白封閉多肽 

環指蛋白40抗體 鋅指蛋白783封閉多肽 

英文名稱: PPAR gamma FAM155A蛋白封閉多肽 

透明質4抗體 胞漿型磷脂A2封閉多肽 

磷化蛋白酪氨磷2抗體 唾液結合性免疫球蛋白樣凝集5封閉多肽 

線粒體內膜轉位抗體 細胞色B還原1封閉多肽 

細胞色P450 2J2抗體 性發育轉錄因子蛋白DMO封閉多肽 

短鏈脫氫/還原家族7C抗體 RAS互動/干擾蛋白1封閉多肽 
大鼠主動脈平滑肌細胞小鼠腦靜脈血管平滑肌細胞培養基100mL小鼠腦靜脈血管平滑肌細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠腦靜脈血管平滑肌細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠腦靜脈血管平滑肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠腦靜脈血管平滑肌細胞的體外培養。

CoC1/DDP細胞專用培養基125mL×4CoC1/DDP細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持CoC1/DDP細胞佳的生長狀態。本產品中已包含CoC1/DDP細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于CoC1/DDP細胞的體外培養。

SNB-19細胞專用培養基125mL×4SNB-19細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持SNB-19細胞佳的生長狀態。本產品中已包含SNB-19細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SNB-19細胞的體外培養。

大鼠胚胎成纖維細胞培養基100mL大鼠胚胎成纖維細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠胚胎成纖維細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠胚胎成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠胚胎成纖維細胞的體外培養。

小鼠脂肪細胞培養基100mL小鼠脂肪細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠脂肪細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠脂肪細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠脂肪細胞的體外培養。

HSPC-1細胞專用培養基125mL×4HSPC-1細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持HSPC-1細胞佳的生長狀態。本產品中已包含HSPC-1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HSPC-1細胞的體外培養。

L5178Y TK+/- clone(3.7.2C)細胞專用培養基125mL×4L5178Y TK+/- clone(3.7.2C)細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持L5178Y TK+/- clone(3.7.2C)細胞佳的生長狀態。本產品中已包含L5178Y TK+/- clone(3.7.2C)細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于L5178Y TK+/- clone(3.7.2C)細胞的體外培養。

 


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