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兔腹腔巨噬細胞

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更新時間:2023-04-23 10:25:55瀏覽次數:264

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腹腔液
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詳細介紹

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產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

兔腹腔巨噬細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

腹腔液

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腹腔;腹腔,即軀干腹部的腔,內襯腹膜,由體壁、橫膈膜和盆底圍成,其內容納胃、肝、膽囊、脾臟、胰、腎臟、腸、闌尾、膀胱、泌尿系和婦科(子宮、附件)等其他內臟器官。巨噬細胞屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得,便于培養,并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養,難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內的白血球,源自單核細胞,而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞,在脊椎動物體內參與非特異性防衛(先天性免疫)和特異性防衛(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細胞,令其對病原體作出反應。巨噬細胞功能及其在疾病發生過程中的作用是目前研究的熱點問題之一;腹腔巨噬細胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍,有重要防御功能。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用反復往腹腔注射培養基并抽取的方法結合差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經CD68免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  巨噬細胞樣

傳代特性  屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液  (12mM)

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體 SAPCD1蛋白封閉多肽 

胞質分裂蛋白8奉獻者抗體 磷化G蛋白信號轉導調節因子19封閉多肽 

鋅指蛋白764抗體 膜粘連蛋白9封閉多肽 

鈉氫通道蛋白9家族A9抗體 脂肪去飽和1封閉多肽 

α肌糖蛋白2抗體 FAM21C蛋白封閉多肽 

ZDHHC14蛋白抗體 FARSLB蛋白封閉多肽 

解旋SNF2L抗體 磷化絲裂原活化蛋白激激5封閉多肽 

線粒體核糖體蛋白S25抗體 氨基酰化1封閉多肽 

肌動蛋白輔助蛋白類樣蛋白抗體 鈉/鉀轉運ATP相互作用蛋白2封閉多肽 

半乳糖神經酰胺抗體 信號通路Wnt9a封閉多肽 

CD72蛋白抗體 髓樣細胞白血病-1封閉多肽 

核受體蛋白NR2E1抗體 磷化谷氨受體2B封閉多肽 

附睪蛋白3A抗體 銜接因子蛋白含pH域蛋白1封閉多肽 

FKBP1A單克隆抗體 G氨基丁B型受體結合蛋白封閉多肽 

轉運蛋白SC24C抗體 高度保守基因相關蛋白Membralin封閉多肽 

TRBP蛋白抗體 重組小鼠程序性死亡配體2蛋白 

鋅指蛋白704抗體 重組小鼠IgG2a Fc蛋白 

磷化Bcl-xL蛋白抗體 6號染色體開放閱讀框129封閉多肽 
兔腹腔巨噬細胞人牙乳頭細胞培養基100mL人牙乳頭細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人牙乳頭細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人牙乳頭細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人牙乳頭細胞的體外培養。

MX-1細胞專用培養基125mL×4MX-1細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持MX-1細胞佳的生長狀態。本產品中已包含MX-1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MX-1細胞的體外培養。

大鼠下丘腦神經元細胞培養基100mL大鼠下丘腦神經元細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠下丘腦神經元細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠下丘腦神經元細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠下丘腦神經元細胞的體外培養。

人表皮成纖維細胞培養基100mL人表皮成纖維細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人表皮成纖維細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人表皮成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人表皮成纖維細胞的體外培養。

兔晶狀體上皮細胞培養基100mL兔晶狀體上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持兔晶狀體上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含兔晶狀體上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔晶狀體上皮細胞的體外培養。

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DMEM高糖(不含酚紅,含HEPES)500mL-


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