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大鼠卵巢成纖維細胞

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更新時間:2023-04-21 16:16:54瀏覽次數:272

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 卵巢組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠卵巢成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

卵巢組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側發育(右側已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產卵期有關。大多數脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構,而所有鳥類只有左側卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結締組織。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質。皮質位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結締組織構成;髓質位于中央,由疏松結締組織構成,其中有許多血管、淋巴管和神經。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的卵巢成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。卵巢成纖維細胞大多分布于卵巢表面,其主要特點和功能:①成纖維細胞在體外易于培養;②卵巢損傷后,成纖維細胞能修復和重塑卵巢;③能在卵巢炎癥時有效控制炎癥擴散。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

磷化三磷腺檸檬裂解抗體 微管相關末端結合蛋白2封閉多肽 

英文名稱: LMO2 原發性纖毛運動障礙相關蛋白DPCD封閉多肽 

FAM57B蛋白抗體 卷曲螺旋結構域蛋白116封閉多肽 

MYRIP蛋白抗體 環指蛋白213封閉多肽 

組蛋白賴氨N-甲基2G抗體 造血祖細胞激1封閉多肽 

9號染色體開放閱讀框140抗體 重組小鼠Thy-1蛋白 

NF-κB活化激抗體 血小板白細胞C激底物同源結構域M2封閉多肽 

磷化細絲蛋白A抗體 卷曲螺旋結構域蛋白47封閉多肽 

Cy5.5標記小鼠抗人CD3單克隆抗體 胞環蛋白肌動蛋白結合蛋白封閉多肽 

視神經視網膜相關蛋白VAX2抗體 OVOS2蛋白封閉多肽 

黑色瘤相關抗原4抗體 泛樣核糖體蛋白S30/MNSF-β封閉多肽 

骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T抗體 Sema6A封閉多肽 

神經突觸前膜胞內蛋白18抗體 組蛋白HIST1H2AL封閉多肽 

磷化肌球蛋白調節多肽9(平滑肌亞型)抗體 蛋白激PKR抑制蛋白PRKRIR封閉多肽 

β淀粉樣肽1-40單克隆抗體 免疫球蛋白超家族成員3封閉多肽 

?磷葡萄糖變位/?-phosphoglucomutase抗體 轉錄因子HES3封閉多肽 

ECT2L蛋白抗體 泛結合UFC1封閉多肽 

轉錄調控因子MRG15抗體 2號染色體開放閱讀框66封閉多肽 
大鼠卵巢成纖維細胞小鼠肝外膽管上皮細胞培養基100mL小鼠肝外膽管上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠肝外膽管上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠肝外膽管上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠肝外膽管上皮細胞的體外培養。

BME(不含L-)500mL-

PLC/PRF/5細胞專用培養基125mL×4PLC/PRF/5細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持PLC/PRF/5細胞佳的生長狀態。本產品中已包含PLC/PRF/5細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于PLC/PRF/5細胞的體外培養。

雞腎小管上皮細胞培養基100mL雞腎小管上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持雞腎小管上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含雞腎小管上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于雞腎小管上皮細胞的體外培養。

293H細胞專用培養基125mL×4293H細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持293H細胞佳的生長狀態。本產品中已包含293H細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于293H細胞的體外培養。

DMEM低糖 (含L-丙氨酰-L-)500mL-

WI38/VA13細胞專用培養基125mL×4WI38/VA13細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持WI38/VA13細胞佳的生長狀態。本產品中已包含WI38/VA13細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于WI38/VA13細胞的體外培養。

 


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