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小鼠心臟纖維原細胞

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更新時間:2023-04-21 15:43:51瀏覽次數:252

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 心臟組織
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詳細介紹

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產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

小鼠心臟纖維原細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

心臟組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自心臟組織;心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成,非心肌細胞占細胞總數的70%,其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成。纖維細胞是機能不活躍的成纖維細胞。胞體呈梭形,胞質較少,弱嗜酸性,胞核小,染色深。電鏡下可見,細胞中粗面內質網和高爾基體均不發達。當組織受損時,纖維細胞可轉化為成纖維細胞而參與修復過程。纖維細胞和成纖維細胞是處于不同功能狀態的同一種細胞,如在組織損傷后的修復過程中,纖維細胞可轉化為功能活躍的成纖維細胞。纖維細胞較小,呈多角形,胞質較少,弱嗜酸性,胞核亦較小,染色較深,電鏡下粗面內質網較少,高爾基復合體不發達。成纖維細胞較大,呈星形或梭形,有突起,細胞核呈卵圓形,染色質稀疏,染色淡,核仁明顯,胞質較多。成纖維細胞能合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和蛋白多糖,形成膠原纖維、彈性纖維和網狀纖維以及基質成分。心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結構支持作用并負責細胞基質外的合成,當心肌損傷時能產生旁分泌生長因子。心肌成纖維細胞是心臟結締組織中常見的細胞,可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網狀纖維及有機基質,并且在外傷等因素刺激下,部分纖維細胞可重新轉變為幼稚的成纖維細胞,其功能活動也得以恢復,參與組織損傷后的修復。因此,對心肌成纖維細胞的生理學研究成為現代心血管領域研究的一個重點。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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β-甘露糖苷抗體 乙酰羧化1/ACCα封閉多肽 豚鼠降鈣基因相關肽(CGRP)ELISA Kit

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小鼠心臟纖維原細胞大鼠外周血淋巴細胞分離液試劑盒英文名稱:大鼠外周血淋巴細胞分離液試劑盒200mL

人外周血淋巴細胞分離液試劑盒英文名稱:人外周血淋巴細胞分離液試劑盒200mL

原代上皮細胞添加劑英文名稱:原代上皮細胞添加劑5mL(100X)

原代內皮細胞添加劑英文名稱:原代內皮細胞添加劑5mL(100X)

原代成纖維細胞添加劑英文名稱:原代成纖維細胞添加劑5mL(100X)

原代平滑肌細胞低血清添加劑英文名稱:原代平滑肌細胞低血清添加劑5mL(100X)

原代平滑肌細胞添加劑英文名稱:原代平滑肌細胞添加劑5mL(100X)


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