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雞腎小管上皮細胞

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更新時間:2023-04-21 14:33:41瀏覽次數:259

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腎組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

雞腎小管上皮細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

腎組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物,同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質,如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳suan氫鈉等,以調節水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內環境的穩定,使新陳代謝得以正常進行。腎小管是機體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細長上皮性小管,具有重吸收(reabsorption)和排泌作用。腎小管按不同的形態結構、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和遠端小管三部分;近端小管可分為直部和曲部,曲部也稱為近曲小管,位于皮質迷路內,于腎小體附近高度蟠曲;遠端小管曲部也稱為遠曲小管,位于皮質迷路內。腎小管上皮細胞是腎小管外面的一層細胞,腎小管上皮細胞的分離、培養是研究腎臟疾病的一項重要技術,目前該細胞分離方法有分離法、化學分離法篩網分離法、顯微解剖分離法、流式細胞儀分離法等。腎小管上皮細胞主要功能:①腎小管上皮細胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸;②排泌非營養物質進入終尿;③細胞能分泌炎癥介質如細胞因子和趨化因子,通過產生IL-8或直接趨化白細胞參與急性炎癥反應;④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達IL-2R和MHC-Ⅱ類抗原,這說明腎小管上皮細胞參與腎免疫損傷的發生。隨著對腎間質纖維化機制研究的日漸加深,腎小管上皮細胞(RTECs)在其中的作用日益被人們重視。因此,提供良好的腎小管上皮細胞模型,在腎小管間質疾病的發病機制和治療藥物篩選的研究中是非常重要的

5.方法簡介:

實驗室分離的采用篩網過濾、膠原消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  上皮細胞樣

傳代特性  可傳1代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

ZMYND19蛋白抗體 衰老標記蛋白30封閉多肽 人游離原卟啉(FEP) ELISA檢測試劑盒

植烷酰羥化2相互作用蛋白抗體 胰島樣生長因子不穩定亞基ALS封閉多肽 人脂多糖結合蛋白(LBP) ELISA Kit

核受體相互作用蛋白1抗體 肌醇單磷IMPA3封閉多肽 人過氧化(GSH-Px) ELISA試劑盒

睪丸特異絲氨/蘇氨激6抗體 21號染色體開放閱讀框63封閉多肽 人(GSH) 試劑盒 ELISA

煙堿型乙酰受體α4抗體 19號染色體開放閱讀框50封閉多肽 人17-酮類固醇(17-KS) ELISA檢測試劑盒

丙型肝炎病毒E2抗體 JAZF1封閉多肽 人17羥皮質類固醇(17-OHCS)ELISA Kit

丙型肝炎病毒NS4B(65kDa)抗體 腫瘤蛋白D53封閉多肽 人組織K(cath-K) ELISA試劑盒

超氧化物歧化2抗體 白細胞共同抗原/CD45多肽 人骨形成蛋白(BMPs)試劑盒 ELISA

超氧化物歧化3抗體 FAM133B蛋白封閉多肽 人結合蛋白4(RBP-4)ELISA檢測試劑盒

DDX4抗體 囊泡乙酰通道封閉多肽 人蛋白脂質蛋白抗體(PLP)ELISA Kit

肺癌癌基因蛋白3抗體 LSM12蛋白封閉多肽 人垂草扁桃(VMA) ELISA試劑盒

轉錄因子E2F-1抗體 EHD3蛋白封閉多肽 人葡萄糖激調節蛋白(GKRP)試劑盒 ELISA

脊髓性肌癥蛋白Gemin4抗體 活化半胱胺蛋白-3封閉多肽 人血凝(HA)ELISA檢測試劑盒

alpha干擾誘導蛋白27樣蛋白2抗體 甲基胞嘧啶雙加氧TET3封閉多肽 人脂肪分化相關蛋白(ADRP)ELISA Kit

FMS樣酪氨激3配體抗體 RSC1A1蛋白封閉多肽 人鈣調結合蛋白(CALD)ELISA試劑盒

組織相容性抗原DOB抗體 Heme結合蛋白2封閉多肽 人鈣調磷(CaN)試劑盒 ELISA

多型性腺瘤基因1蛋白抗體 雞卵白蛋白(高純度) 人骨退化特異標志物(CTX-2)ELISA檢測試劑盒

磷激1抗體 磷化p21激活激3封閉多肽 人鈣結合蛋白(CR)ELISA Kit
雞腎小管上皮細胞大鼠氣管平滑肌細胞英文名稱:大鼠氣管平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠支氣管上皮細胞英文名稱:大鼠支氣管上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠支氣管平滑肌細胞英文名稱:大鼠支氣管平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠肺成纖維細胞英文名稱:大鼠肺成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠肺巨噬細胞英文名稱:大鼠肺巨噬細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠肺微血管周細胞英文名稱:大鼠肺微血管周細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠心肌細胞英文名稱:大鼠心肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

 


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