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小鼠三叉神經星形膠質細胞

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更新時間:2023-04-21 15:45:19瀏覽次數:239

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腦組織
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詳細介紹

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產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

小鼠三叉神經星形膠質細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

腦組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自三叉神經組織;三叉神經為粗大的混合性腦神經,含一般軀體感覺和特殊內臟運動兩種纖維。其特殊內臟運動纖維起于腦橋中段的三叉神經運動核,纖維組成三叉神經運動根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處出腦,位于感覺根下內側,后進入三叉神經第3支下頜神經中,經卵圓孔出顱,隨下頜神經分支分布于咀嚼肌等。運動根內還含有三叉神經中腦核有關的纖維,主要傳導咀嚼肌的本體感覺。三叉神經內以軀體感覺神經纖維為主,這些纖維的細胞體位于三叉神經節(半月節)內,該神經節位于顱中窩顴骨巖部的前面三叉神經壓跡處,為硬腦膜形成的美克爾腔包裹。神經膠質細胞是神經組織中除神經元以外的另一大類細胞,也有突起,但無樹突和軸突之分,廣泛分布于中樞和周圍神經系統。在哺乳類動物中,神經膠質細胞與神經元的細胞數量比例約為10:1。在中樞神經系統(CNS)中的神經膠質細胞主要有星形膠質細胞、少突膠質細胞(與前者合稱為大膠質細胞)和小膠質細胞等。傳統認為膠質細胞屬于結締組織,其作用僅是連接和支持各種神經成分,其實神經膠質還起著分配營養物質、參與修復和吞噬的作用,在形態、化學特征和胚胎起源上都不同于普通結締組織。星形膠質前體細胞主要表達Vimentin,而成熟之后表達Vimentin和膠質纖維酸性蛋白(GFAP),故GFAP被認為是星形膠質細胞成熟的標志物。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白消化法結合差速貼壁法篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經星形膠質細胞經GFAP免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  梭形、多角形

傳代特性  可傳2-3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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錨定蛋白重復結構域蛋白激ANKK1抗體 補體C2b鏈多肽封閉多肽 豬血管生成2(ANG-2)ELISA檢測試劑盒

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小鼠三叉神經星形膠質細胞原代T淋巴細胞添加劑英文名稱:原代T淋巴細胞添加劑5mL(100X)

原代基質細胞添加劑英文名稱:原代基質細胞添加劑5mL(100X)

原代卵巢顆粒細胞添加劑英文名稱:原代卵巢顆粒細胞添加劑5mL(100X)

原代肥大細胞添加劑英文名稱:原代肥大細胞添加劑5mL(100X)

原代樹突狀(DC)細胞添加劑英文名稱:原代樹突狀(DC)細胞添加劑5mL(100X)

原代破骨細胞添加劑英文名稱:原代破骨細胞添加劑5mL(100X)

原代NK細胞添加劑英文名稱:原代NK細胞添加劑5mL(100X)


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