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大鼠肺血管平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-23 10:23:33瀏覽次數:229

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肺組織
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詳細介紹

1.png

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠肺血管平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

肺組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。肺血管平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。肺血管平滑肌細胞主要功能:①細胞表面表達介質(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應;②是多數重要動脈疾病的靶細胞。肺血管平滑肌細胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓;②先天性肺動脈狹窄;③肺動脈栓塞。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關鍵因素,新研究表明血管平滑肌細胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應,并且與血管疾病的發展及穩定性有關。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

泛結構域蛋白1抗體 FAM98C蛋白封閉多肽 

突觸小泡蛋白樣蛋白1抗體 細胞外信號調節激5封閉多肽 

酪蛋白激1γ2抗體 吸引封閉多肽 

FAM101B蛋白抗體 碳氫鈉協同轉運蛋白4-A4突變型封閉多肽 

白介-22抗體 性鈣調蛋白3封閉多肽 

RAB6蛋白抗體 卵黃狀黃斑病蛋白4封閉多肽 

PYROXD2蛋白抗體 環腺苷應答元件結合蛋白封閉多肽 

范可尼貧血組蛋白A抗體 凋亡相關蛋白激3封閉多肽 

亮氨拉鏈樣轉錄調節因子1抗體 Runx3封閉多肽 

產氣莢膜梭菌(魏氏梭菌)磷脂C抗體 鉀電壓閥門通道混合器相關亞家族成員7封閉多肽 

嘌呤元結合蛋白G抗體 人類乳頭狀瘤病毒18 E6封閉多肽 

磷化甲狀腺受體相關蛋白220抗體 FOXJ3蛋白封閉多肽 

磷化整合β3/CD61抗體 叉頭蛋白O1/O3/O4封閉多肽 

角蛋白相關蛋白11-1抗體 P73腫瘤抑制基因封閉多肽 

硫辛酰連接抗體 磷羧化2封閉多肽 

連接粘附分子C抗體 四連接同源蛋白FJX1封閉多肽 

英文名稱: Beta Actin (CAEEL,Loading Control) 核黃轉運蛋白2封閉多肽 

G蛋白結合蛋白7抗體 磷化ZCWCC1封閉多肽 
大鼠肺血管平滑肌細胞R 1610細胞專用培養基125mL×4R 1610細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持R 1610細胞佳的生長狀態。本產品中已包含R 1610細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于R 1610細胞的體外培養。

T98G細胞專用培養基125mL×4T98G細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持T98G細胞佳的生長狀態。本產品中已包含T98G細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于T98G細胞的體外培養。

HFSF細胞專用培養基125mL×4HFSF細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持HFSF細胞佳的生長狀態。本產品中已包含HFSF細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HFSF細胞的體外培養。

DMEM無糖(不含鈉)500mL-

DMEM高糖(不含L-,含雙抗)500mL-

兔腸動脈內皮細胞培養基100mL兔腸動脈內皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持兔腸動脈內皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含兔腸動脈內皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔腸動脈內皮細胞的體外培養。

MRC-5細胞專用培養基125mL×4MRC-5細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持MRC-5細胞佳的生長狀態。本產品中已包含MRC-5細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MRC-5細胞的體外培養。


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