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實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產品名稱：Medium M3基礎培養基細胞

英文名稱：Medium M3

貨號：BJ-01X10006

產品規格：500ml

 

我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，公司產品僅用于科研由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，*進口來源，*保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

培養操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

豬粘蛋白2(MUC2)聯免疫吸附測定試劑盒棕櫚油酯銅片  AR,99.5% metals basis雙環辛烯化銠二聚體 98%

豬自身免疫調節因子(AIRE)聯免疫吸附測定試劑盒四庚溴化銨銅 SP(1,5-己二烯)銠(I),二聚體 98%

豬紅藻氨離子型谷氨受體2(GRIK2)聯免疫吸附測定試劑盒 四庚溴化銨銅粒 99.99% metals basis,粒徑<5mm代三叔丁磷化金(I) 97%

豬膽磷甘油酯(PC/CPG)聯免疫吸附測定試劑盒 四庚溴化銨銅標準溶液1.0mg/l,水質標樣(三膦)金 98%

豬滑行蛋白β(TXLNb)聯免疫吸附測定試劑盒四丁溴化銨超細球形銅粉 99.9%，D50(0.2～0.55μm) (二膦)化金 97%

豬唾液淀粉α1(AMY1)聯免疫吸附測定試劑盒 四丁溴化銨銅粉 99.9% metals basis,200目(三苯膦)化金(I) 98%

豬補體成分4a(C4a)聯免疫吸附測定試劑盒四丁溴化銨銅粉  99.8% metals basis，20μm氧(環辛二烯)銥(I)二聚體 96%

豬β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)聯免疫吸附測定試劑盒四乙溴化銨納米銅粉 99.9% metals basis,10-30nm(1,1'-雙(二苯膦)二茂鐵)二化鎳  97%

豬骨形態形成蛋白拮抗蛋白1(GREM1)聯免疫吸附測定試劑盒四乙溴化銨納米銅粉 99.9% metals basis,80-100nm1,2-雙(二苯膦)乙烷化鎳  98%

豬接頭蛋白2(ELMO2)聯免疫吸附測定試劑盒四乙溴化銨鈷 99.5%，300目2-(二環己膦)聯苯 98%

豬黑色素瘤相關抗原(MAGE)聯免疫吸附測定試劑盒四乙化銨鎳 AR,99.5%2-二環己膦-2'-(N,N-二)-聯苯  98%

豬甘露糖受體(MR)聯免疫吸附測定試劑盒 四乙化銨不銹鋼粉 200目二叔丁化膦 96%

豬過氧化還原2(PRDX2)聯免疫吸附測定試劑盒四乙化銨不銹鋼粉 200目二溴雙(三苯磷)化鎳 99%

豬絲氨/蘇氨激39(STK39)聯免疫吸附測定試劑盒 四乙化銨不銹鋼粉 200目(S, S)-環己二 98%

豬磷烯式羧激1(PCK1)聯免疫吸附測定試劑盒四乙化銨敵草隆 分析標準品，99.5%(R, R)-環己二 98%

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