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大鼠腦膜成纖維細胞

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更新時間:2023-04-21 12:53:17瀏覽次數:261

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腦膜組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠腦膜成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

腦膜組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腦膜組織;腦膜是顱骨與腦間的隔膜,一共有三層,由外向內為硬腦膜、蛛網膜和軟腦膜。硬腦膜,是一厚而堅韌的雙層膜,外層是顱骨內面的骨膜,僅疏松地附于顱蓋,特別是在枕部與顳部附著更疏松,稱為骨膜層。蛛網膜是一層半透明的膜,位于硬腦膜深部,其間有潛在性腔隙為硬腦膜下隙。軟腦膜是緊貼于腦表面的一層透明薄膜,并伸入溝裂。在腦室壁的某些部位,軟腦膜及其血管與室管膜上皮共同形成脈絡組織。脈絡組織中的血管反復分支成叢,突入腦室形成脈絡叢。腦膜細胞圍繞著大腦,參與中樞神經系統的正常發育,能穩定腦軟膜表面的細胞外基質、組織放射狀膠質細胞網絡和小腦皮層分層結構。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用混合膠原消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3代左右;1-2代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

磷化微管相關蛋白抗體 重組結核桿菌EsxB/ESAT6蛋白 大鼠D-乳脫氫(D-LDH)ELISA試劑盒

轉化生長因子β/TGFβ抗體 重組人白介20受體α鏈蛋白 大鼠胸腺活化調節趨化因子(TARC/CCL17)試劑盒ELISA

磷化氨基末端激1/2/3抗體 KIAA1549蛋白封閉多肽 大鼠(CH)ELISA檢測試劑盒

卷曲螺旋結構域蛋白124抗體 ?磷葡萄糖變位/?-phosphoglucomutase封閉多肽 大鼠甘油三酯(TG)elisa試劑盒

英文名稱: Bub3 氣味結合蛋白封閉多肽 大鼠低密度脂蛋白(LDL)試劑盒elisa

金屬硫蛋白3抗體 轉運蛋白SEC23B封閉多肽 大鼠高密度脂蛋白(HDL)檢測試劑盒elisa

磷化腫瘤抑制基因P53抗體 P18剪接調節蛋白封閉多肽  大鼠孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒

磷化干擾調節因子7抗體 細胞核因子p50/k基因結合核因子封閉多肽 大鼠血管緊張Ⅱ轉化(ACEⅡ)試劑盒ELISA

周期依賴性激8抗體 基質金屬25封閉多肽 大鼠血管緊張Ⅰ轉化(ACEⅠ)ELISA檢測試劑盒

磷化乳腺癌易感基因1抗體 腫瘤壞死因子配體超家族成員15封閉多肽 大鼠促性腺激釋放激受體(GnRHR)elisa試劑盒

KBTBD2蛋白抗體 胸腺細胞核蛋白1封閉多肽 大鼠磷化腺苷活化蛋白激(AMPK)試劑盒elisa

臂板蛋白3F抗體 肌凝蛋白X封閉多肽 大鼠熱休克蛋白47(HSP47)檢測試劑盒elisa

E選擇抗體 短鏈脫氫/還原家族7B封閉多肽 大鼠內源性糖皮質激(GC)ELISA試劑盒

緊密連接蛋白25抗體 重組2 Spike突變蛋白RBD(N501Y) (His Tag) 大鼠檸檬合(CS)試劑盒ELISA

動力蛋白激活蛋白2抗體 泛樣蛋白SUMO1激活封閉多肽 大鼠L-鼠乳脫氫(L-LDH)ELISA檢測試劑盒

蛋白激MST2抗體 二氫嘧啶相關蛋白3封閉多肽 大鼠脂酰合成(ACS)elisa試劑盒

脂蛋白脂抗體 多效生長因子封閉多肽 大鼠肉毒堿脂酰轉移(CACT)試劑盒elisa

DNA聚合εp59/DNA pol εp59抗體 周期G封閉多肽 大鼠磷化乙酰羧化(pACCase)檢測試劑盒elisa
大鼠腦膜成纖維細胞HFF-1人皮膚成纖維細胞專用培養基英文名稱:HFF-1細胞專用培養基500ML

HGC-27人胃癌細胞專用培養基英文名稱:HGC-27細胞專用培養基125ML

HGC-27人胃癌細胞專用培養基英文名稱:HGC-27細胞專用培養基500ML

HGC-27+YFP人胃癌黃色熒光標記細胞專用培養基英文名稱:HGC-27+YFP細胞專用培養基125ML

HGC-27+YFP人胃癌黃色熒光標記細胞專用培養基英文名稱:HGC-27+YFP細胞專用培養基500ML

HK-2人腎皮質近曲小管上皮細胞專用培養基英文名稱:HK-2細胞專用培養基500ML

HKb-20人腎上皮細胞專用培養基英文名稱:HKb-20細胞專用培養基125ML

 


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