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小鼠浦肯野細胞

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更新時間:2023-04-21 12:53:53瀏覽次數:350

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 小腦組織
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詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自小腦皮質組織;小腦的表面被覆著一層灰質,叫小腦皮質,小腦皮質分為3層,從表及里分別為分子層、浦肯野細胞層和顆粒細胞層。皮質里含有星狀細胞、籃狀細胞、浦肯野細胞、高爾基細胞和顆粒細胞等5種神經元。浦肯野細胞發出的軸突組成小腦皮質的傳出纖維,終止于小腦白質內的神經核。浦肯野細胞(Purkinje cell)是從小腦皮質發出的能夠傳出沖動的神經元。人的小腦皮質約有1500萬個浦肯野細胞。浦肯野細胞還廣泛分布于心室。顯著的電生理特點是傳導性強,傳導速度快,可達4000mm/s。屬快反應自律型細胞,具有舒張期自動除極化的性能,因而有自律性,但自律性強度明顯低于竇房結P細胞。這類細胞常常平行排列,細胞內電阻低,只有心室細胞的1/3。小腦:浦肯野細胞是小腦皮質中大的神經元,細胞體呈梨形,頂端發出2~3條粗大的主樹突,向外伸入分子層。主樹突沿途分支繁茂,形如展開的、扁薄的扇形,鋪展在與小腦葉片長軸垂直的平面上。樹突分支上有大量的樹突棘,與傳入纖維構成廣泛的突觸聯系,接受傳入小腦的全部信息。軸突由細胞底部(與主樹突相對方向)發出,細長,離開胞體不遠便形成有髓神經纖維,向內經顆粒層離開皮質進入白質,組成小腦皮質的傳出纖維,終止于小腦內部的神經核團。一個浦肯野細胞的軸突約形成500個終末膨大,約與小腦深部核團的35個神經元形成突觸。心臟浦肯野細胞常常平行排列,幾個細胞互相以漿膜連接排成一個小束,小束外包繞著基底膜。細胞內含肌原纖維很少,胞漿區內充滿糖原顆粒、線粒體和肌漿網,細胞內電阻低,只有心室細胞的1/3。浦肯野細胞內無橫管系統,但膜電容比收縮細胞大,可能是由于其閏盤結構廣泛而復雜,提供了較大的表面積的緣故。浦肯野細胞閏盤的主要成分是縫隙連接,粒著膜占的比例很少,這些可能是構成浦肯野細胞傳導快的形態學基礎。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白消化法結合神經元專用培養基、化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶

6.質量檢測:

實驗室分離的經Neph3免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  含脂質濃縮液、BSA、Monothioglycerol、Transferrin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  神經元細胞樣

傳代特性  不增殖;不傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

小鼠浦肯野細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

小腦組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

脫氫E2抗體 CD83封閉多肽 大鼠脂多糖結合蛋白(LBP)ELISA試劑盒

肝腸鈣粘連蛋白抗體 重組人CD3E蛋白 大鼠乙醇脫氫(ADH)試劑盒ELISA

無腦回的致病基因LIS1抗體 神經營養因子-3前蛋白封閉多肽 大鼠乙醛脫氫(ALDH)ELISA檢測試劑盒

生長抑抗體 Kelch樣蛋白36封閉多肽 大鼠可溶性CD14(sCD14)elisa試劑盒

干擾epsilon 1蛋白抗體 泛D封閉多肽 大鼠繆勒管抑制物質/抗繆勒管激(MIS/AMH)試劑盒elisa

磺酰脲類藥物受體1抗體 共濟失調蛋白7樣1封閉多肽 大鼠雄激(androgen)檢測試劑盒elisa

白介22受體結合蛋白抗體 轉運蛋白G3PP封閉多肽 大鼠Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒

性線粒體肌激抗體 鋅指蛋白583封閉多肽 大鼠多巴胺轉運蛋白(DAT)試劑盒ELISA

MAP3K13蛋白抗體 干擾相關發育調節因子2封閉多肽 大鼠多巴胺D2受體(D2R)ELISA檢測試劑盒

乙酰化化組蛋白H2B (Lys24)鼠單克隆抗體 三磷腺苷結合轉運蛋白G超家族成員5封閉多肽 大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)elisa試劑盒

英文名稱: CD23 GATA結合蛋白6封閉多肽 大鼠CD44分子(CD44)試劑盒elisa

蛋白磷γ1抗體 精氨結合蛋白2封閉多肽 大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)檢測試劑盒elisa

磷化轉錄中介因子Tif1β抗體 磷化蛋白激AKT1,2,3封閉多肽 大鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒

造血干細胞抗原CD133抗體 RAN結合蛋白1封閉多肽 大鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒ELISA

白介-1受體相關激4抗體 富含亮氨重復結構域蛋白6封閉多肽 大鼠胰島自身抗體(IAA)ELISA檢測試劑盒

多發性肌炎/硬皮病自身抗原2抗體 磷化P21蛋白激活的蛋白激6封閉多肽 大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)elisa試劑盒

轉錄因子THOC2抗體 雙特異性蛋白磷5封閉多肽 大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)試劑盒elisa

磷化白介-1受體相關激1抗體 嗜粒細胞趨化蛋白22封閉多肽 大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)檢測試劑盒elisa
小鼠浦肯野細胞HMEC-1人微血管內皮株細胞專用培養基英文名稱:HMEC-1細胞專用培養基100ML

HMEC-1人微血管內皮株細胞專用培養基英文名稱:HMEC-1細胞專用培養基500ML

HO-8910PM人高轉移卵巢癌細胞專用培養基英文名稱:HO-8910PM細胞專用培養基125ML

HO-8910PM人高轉移卵巢癌細胞專用培養基英文名稱:HO-8910PM細胞專用培養基500ML

HOS人骨肉瘤細胞專用培養基英文名稱:HOS細胞專用培養基125ML

HOS人骨肉瘤細胞專用培養基英文名稱:HOS細胞專用培養基500ML

HPAC人胰腺癌細胞專用培養基英文名稱:HPAC細胞專用培養基125ML
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

 


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