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人顱蓋造骨細胞

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更新時間:2023-04-21 16:18:54瀏覽次數:251

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 顱骨組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人顱蓋造骨細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

顱骨組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自顱骨組織;造骨細胞(osteoblast)亦稱成骨細胞。是參與骨組織形成的細胞。顱骨位于脊柱上方,由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規則骨組成。除下頜骨及舌骨外,其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結,起著保護和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部,內有顱腔,容納腦,共8塊。面顱為顱的前下部分,包含眶、鼻腔、口腔等結構,構成面部的支架,共15塊。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞,負責骨基質的合成、分泌和礦化。骨不斷地進行著重建,骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區域,分泌suan性物質溶解礦物質,分泌dan白消化骨基質,形成骨吸收陷窩;其后,成骨細胞移行至被吸收部位,分泌骨基質,骨基質礦化而形成新骨;破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關鍵。成骨細胞培養不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統疾病的分子和細胞學基礎,也是藥物篩選、生物材料開發和生物工程研究的重要手段。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經ALP染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  梭形、多角形

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

原癌基因R-Ras抗體 重組人脂聯蛋白 

FOXN4蛋白抗體 磷化DNA拓普西異構Ⅱ封閉多肽 

細胞質分裂付出蛋白5抗體 A型病毒H7N9 M1蛋白封閉多肽 

磷化核突觸蛋白α抗體 粘蛋白7封閉多肽 

英文名稱: CEA(ready to ues) 羥類固醇脫氫17β2封閉多肽 

嗜性粒細胞陽離子型核糖核5抗體 IQSEC3蛋白封閉多肽 

促微管蛋白聚合蛋白家族成員2抗體 金屬離子轉運體1封閉多肽 

FAM105B蛋白抗體 色氨羥化封閉多肽 

FAM193B蛋白抗體 Attractin蛋白封閉多肽 

6號染色體開放閱讀框1抗體 FCRL6蛋白封閉多肽 

激肽釋放7抗體 細胞因子信號傳導抑制蛋白1封閉多肽 

G蛋白偶聯受體169抗體 鋅指蛋白112封閉多肽 

胞漿鈣獨立磷脂A2抗體 LSM6蛋白封閉多肽 

TRIM50C蛋白抗體 HSV Tag多肽 

鋅指蛋白114抗體 磷化絲裂原活化蛋白激1封閉多肽 

21號染色體開放閱讀框58抗體 CD9蛋白封閉多肽 

補體因子I輕鏈抗體 囊泡谷氨轉運蛋白2封閉多肽 

雙特異性蛋白磷7抗體 磷化周期蛋白依賴激抑制因子1C封閉多肽 
人顱蓋造骨細胞MEM (高糖、高濃度碳氫鈉,不含L-)500mL-

小鼠下丘腦神經元細胞培養基100mL小鼠下丘腦神經元細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠下丘腦神經元細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠下丘腦神經元細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠下丘腦神經元細胞的體外培養。

PC-3M細胞專用培養基125mL×4PC-3M細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持PC-3M細胞佳的生長狀態。本產品中已包含PC-3M細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于PC-3M細胞的體外培養。

人口腔上皮細胞培養基100mL人口腔上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人口腔上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人口腔上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人口腔上皮細胞的體外培養。

RBL-1細胞專用培養基125mL×4RBL-1細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持RBL-1細胞佳的生長狀態。本產品中已包含RBL-1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于RBL-1細胞的體外培養。

MEM無糖 (含NEAA、L-丙氨酰-L-、HEPES)500mL-

NAMALWA細胞專用培養基125mL×4NAMALWA細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持NAMALWA細胞佳的生長狀態。本產品中已包含NAMALWA細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于NAMALWA細胞的體外培養。

 


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