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小鼠肺泡巨噬細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 10:20:19瀏覽次數(shù):285

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 肺組織
小鼠肺泡巨噬細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶A7r5 (大鼠胸大動脈平滑肌細(xì)胞) (種屬鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠胰島細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶NCI-H23 (人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶TC-1 (小鼠肺上皮細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠肺泡巨噬細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肺組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自肺組織;肺是機(jī)體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。肺泡由單層上皮細(xì)胞構(gòu)成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經(jīng)多次反復(fù)分枝成無數(shù)細(xì)支氣管,它們的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即為肺泡。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,有多種功能,是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,源自單核細(xì)胞,而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞,令其對病原體作出反應(yīng)。肺泡巨噬細(xì)胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍,有重要防御功能。肺泡是重要的巨噬細(xì)胞儲存器官,為結(jié)核病的研究提供了重要的材料。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用機(jī)械研磨結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  巨噬細(xì)胞樣

傳代特性  屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液  (12mM)

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

NBPF11蛋白抗體 線粒體核糖核P蛋白3封閉多肽 

FAM190B蛋白抗體 鈣平衡調(diào)節(jié)蛋白1封閉多肽 

英文名稱: alpha smooth muscle Actin GRWD1蛋白封閉多肽 

鋅指蛋白839抗體 核糖體RNA合成蛋白42封閉多肽 

高遷移率族蛋白A1抗體 促血管平滑肌細(xì)胞分化因子封閉多肽 

RAP2C蛋白抗體 磷化補(bǔ)體成分5受體1封閉多肽 

卵磷酯酰基轉(zhuǎn)移抗體 PRTG蛋白封閉多肽 

富含亮氨重復(fù)蛋白24抗體 鋅指蛋白ZIC5封閉多肽 

原肌球蛋白4抗體 4號染色體開放閱讀框27封閉多肽 

中心體蛋白192抗體 組織相容性復(fù)合體蛋白1封閉多肽 

雞新城疫血凝抗體 金屬組織抑制因子-2封閉多肽 

F-box蛋白相關(guān)蛋白36抗體 重組人周期D1蛋白 

FAM49B蛋白抗體 視黃受體應(yīng)答蛋白1封閉多肽 

G蛋白偶聯(lián)受體8抗體 上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2封閉多肽 

L選擇抗體 磷化gp130封閉多肽 

多巴胺受體相互作用蛋白1抗體 22號染色體開放閱讀框29封閉多肽 

磷化組蛋白去乙酰化8抗體 ZMYND17蛋白封閉多肽 

RTDR1蛋白抗體 蛋白磷PPP1R11封閉多肽 
小鼠肺泡巨噬細(xì)胞人主動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人主動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人主動脈平滑肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人主動脈平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人主動脈平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

LLC-MK2細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4LLC-MK2細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持LLC-MK2細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含LLC-MK2細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于LLC-MK2細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM低糖 (不含酚紅、L-、鈉,含HEPES)500mL-

小鼠脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠脂肪干細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠脂肪干細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠脂肪干細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠肺泡巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠肺泡巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠肺泡巨噬細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠肺泡巨噬細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠肺泡巨噬細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

 


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