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人胰腺癌組織源星狀細胞

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更新時間:2023-04-23 10:00:57瀏覽次數:258

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 胰腺癌組織
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詳細介紹

1.png

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人胰腺癌組織源星狀細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

胰腺癌組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自患有胰腺癌病人的胰腺癌組織;胰腺癌是一種惡性程 度很高,診斷和治療都很困難的消化道惡性腫瘤,約90%為起源于腺管上皮的導管腺癌。其發病率和死亡率近年來明顯上升。5年生存率<1%,是預后差的惡性腫瘤之一。胰腺癌早期的確診率不高,手術死亡率較高,發揮重要的作用。因此針對胰腺星狀細胞和胰腺癌細胞相互作用的研究有望提高胰腺癌患者的預后。胰腺星狀細胞(pancreaticstellate cells , PSC)是一種胰腺特異性間質細胞,多在胰腺組織內血管和導管周圍聚集,環繞在腺泡的基底部位,正常靜比狀態下只占胰腺細胞的4%左右,細胞質中含有豐富的維生素A脂滴,以表達膠質纖絲suan性蛋白質(glial filament acidic protein , GFAP )、結合蛋白(Desmin)為特征。在胰腺組織損傷、應激等條件下PSC被激活,成為一種肌成纖維細胞,胞質中富含維生素A的脂滴消失,以表達α-平滑肌肌動蛋白(α-smooth muscle actin , α-SMA)為標志,能大量合成細胞外基質(extracellular matrix , ECM)和分泌多種細胞因子。胰腺癌微環境中存在大量激活的PSC,在胰腺癌的發生發展中起著重要作用。PSC通過誘導胰腺癌細胞(pancreatic cancercells , PCC)上皮一間質轉變(epithelial-mesenchymaltransition , EMT)促進胰腺癌侵襲和轉移侵襲和轉移是腫瘤細胞脫離原發腫瘤灶到達靶器官的一個多步驟過程,眾多研究表明EMT與胰腺癌的侵襲轉移密切相關。EMT主要的特征是上皮細胞特征丟失同時伴間質細胞特征獲得,如E一鈣茹蛋白(E-cadherin)表達下降,波形蛋白(Vimentin)表達上調。karnevi等研究發現,PSC與PCC共培養后能夠誘導PCC上皮性細胞標志(E-cadherin , β-catenin)丟失,促進間質性細胞標志(Vimentin,Snai-1)獲得,表明PSC在PCC的EMT形成過程中發揮了重要的作用。PSC參與胰腺癌進展的各個環節,而PSC活化是PSC發揮功能的重要部分。因此,如能抑制PSC活化或控制PSC細胞功能將為胰腺癌療提供潛在的治療策略。因此,隨著針對抑制PSC活化或其功能的研究的深入,有望從胰腺癌微環境角度切實提高胰腺癌效果。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化法結合密度梯度離心法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、EGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

單鏈DNA結合蛋白2抗體 富含精氨/絲氨剪切因子11封閉多肽 

ATP-依賴的RNA解旋30抗體 開關相關蛋白70封閉多肽 

細胞色P450 F2抗體 精子相關蛋白AKAP封閉多肽 

Muellerian繆勒管激抑制因子單克隆抗體 細胞內流鉀通道蛋白Kir5.1封閉多肽 

英文名稱: CPN10 hUPF2蛋白封閉多肽 

絲氨抑制劑B3抗體 羧肽CPO封閉多肽 

磷化電壓門控性鉀通道蛋白Kv4.2抗體 RSPRY1蛋白封閉多肽 

堿性亮氨拉鏈蛋白BZW1抗體 P2Y4受體封閉多肽 

多藥耐藥相關蛋白4抗體 磷化原癌基因c-Raf封閉多肽 

脫氧輔合蛋白抗體 霍亂腸毒β鏈封閉多肽 

干擾α-1b/IFN a1b抗體 卵黃樣羧肽封閉多肽 

睪丸特異性核苷果糖β抗體 FAM196B蛋白封閉多肽 

細胞粘附分子伴侶蛋白1抗體 血管生成相關蛋白5封閉多肽 

磷化驅動蛋白樣蛋白1抗體 RALGPS1蛋白封閉多肽 

胰島樣生長因子ⅡmRNA結合蛋白2抗體 gasdermin蛋白封閉多肽 

肌側索硬化癥相關蛋白FIG4抗體 去泛化22封閉多肽 

鳥苷激GMK抗體 FAM124B蛋白封閉多肽 

陽離子通道精子相關蛋白4抗體 G蛋白結合蛋白RAB6A封閉多肽 
人胰腺癌組織源星狀細胞小鼠子宮內膜基質細胞培養基100mL小鼠子宮內膜基質細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠子宮內膜基質細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠子宮內膜基質細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠子宮內膜基質細胞的體外培養。

COS-7細胞專用培養基125mL×4COS-7細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持COS-7細胞佳的生長狀態。本產品中已包含COS-7細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于COS-7細胞的體外培養。

大鼠NG2細胞培養基100mL大鼠NG2細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠NG2細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠NG2細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠NG2細胞的體外培養。

人牙齦成纖維細胞培養基100mL人牙齦成纖維細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人牙齦成纖維細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人牙齦成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人牙齦成纖維細胞的體外培養。本產品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

MEM(ATCC改良)500mL-

小鼠小腸隱窩上皮細胞培養基100mL小鼠小腸隱窩上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠小腸隱窩上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠小腸隱窩上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠小腸隱窩上皮細胞的體外培養。

DMEM高糖(含HEPES,不含鈉)500mL-


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