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大鼠嗅鞘細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 12:55:18瀏覽次數(shù):291

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 嗅球組織
大鼠嗅鞘細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:A375+EGFP人惡性黑色瘤+EGFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLA375+EGFP人惡性黑色瘤+EGFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLA431(A-431)人表皮癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLA431(A-431)人表皮癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLA498人腎癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠嗅鞘細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

嗅球組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自嗅球組織;嗅鞘細(xì)胞(OECs)是在功能上介于施旺細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞之間的一種特殊的膠質(zhì)細(xì)胞,具有神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)、抑制膠質(zhì)增生、瘢痕形成、成鞘作用等;為軸突生長(zhǎng)提供了適宜的微環(huán)境及較強(qiáng)的遷移的特性,使其成為促進(jìn)中樞神經(jīng)再生的理想候選細(xì)胞之一。嗅鞘細(xì)胞是目前所發(fā)現(xiàn)的極少數(shù)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)可以再生細(xì)胞之一,其特點(diǎn)為終身具有神經(jīng)再生功能,還能夠釋放多種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、神經(jīng)粘附分子。被認(rèn)為是髓鞘化能力強(qiáng)的膠質(zhì)細(xì)胞,逐漸用于治療脊髓損傷。嗅鞘細(xì)胞與膠質(zhì)細(xì)胞、雪旺細(xì)胞在表現(xiàn)型上有共同點(diǎn),它們都能促進(jìn)軸突的再生,主要區(qū)別在于嗅鞘細(xì)胞不但存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng),也存在于外周神經(jīng)中。嗅鞘細(xì)胞被認(rèn)為是一種可塑性很高的細(xì)胞,它可表現(xiàn)出多種細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞表面標(biāo)志,在嗅系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程中,嗅鞘細(xì)胞根據(jù)其在組織定位的不同而有不同的抗原表型,其中P75NTR、GFAP、和O4可標(biāo)記大部分在體嗅鞘細(xì)胞,然而在嗅球外神經(jīng)層O4陽(yáng)性嗅鞘細(xì)胞仍然可以在P75NTR陽(yáng)性細(xì)胞層內(nèi)分化成E-NCAM陽(yáng)性的細(xì)胞層,還有一定比率的嗅鞘細(xì)胞P75NTR陰性而NY和S100表型為陽(yáng)性。嗅黏膜中的神經(jīng)元是生后才生長(zhǎng)并在成年時(shí)繼續(xù)分化的神經(jīng)元,壽命為4-12周,隨著新細(xì)胞的生長(zhǎng),又建立了新的神經(jīng)支配關(guān)系。嗅鞘細(xì)胞存在于嗅神經(jīng)及嗅球的神經(jīng)層上,沿嗅神經(jīng)的全長(zhǎng),從周圍神經(jīng)系統(tǒng)到中樞神經(jīng)分布。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法、結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

英文名稱: HDAC1 (Nuclear Loading Control) G蛋白偶聯(lián)受體30封閉多肽 大鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒

BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 糖原蛋白1 大鼠腎上腺能a1A受體(ADRA1A)試劑盒ELISA

鋅指蛋白342抗體 鋅指蛋白502封閉多肽 大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA檢測(cè)試劑盒

血管生成樣蛋白3抗體 早期發(fā)育調(diào)控蛋白1/EDR1封閉多肽 大鼠透明質(zhì)結(jié)合蛋白(HABP)elisa試劑盒

DNA聚合μ/DNA pol μ抗體 氫離子電壓門(mén)控通道蛋白1封閉多肽 大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒elisa

緊密連接蛋白5抗體 抑制肌原調(diào)節(jié)蛋白1封閉多肽 大鼠淋巴細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒elisa

FAM73B蛋白抗體 PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK9蛋白封閉多肽 大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴氨酰-脯氨(AcSDKP)ELISA試劑盒

轉(zhuǎn)胺1抗體 DIEXF蛋白封閉多肽 大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)試劑盒ELISA

嗅球蛋白2抗體 微管蛋白特定伴侶蛋白E封閉多肽 大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA檢測(cè)試劑盒

英文名稱: phospho-Nrf2 (Ser40) EFCAB1蛋白封閉多肽 大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)elisa試劑盒

周期G2抗體 前列腺E合成2封閉多肽 大鼠Smad1試劑盒elisa

脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)2型蛋白抗體 肝細(xì)胞核因子1α封閉多肽 大鼠Smad7檢測(cè)試劑盒elisa

糖原生成相互作用蛋白抗體 GTP結(jié)合蛋白SAR1B封閉多肽 大鼠26S體(26SPSM)ELISA試劑盒

多聚腺苷結(jié)合蛋白2抗體 基質(zhì)交感分子2封閉多肽 大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)試劑盒ELISA

骨保護(hù)蛋白/護(hù)骨抗體 溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族30成員2封閉多肽 大鼠內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪(visfatin)ELISA檢測(cè)試劑盒

一氧化氮合成-2(誘導(dǎo)型)抗體 組蛋白去甲基轉(zhuǎn)移JMJD7封閉多肽 大鼠胰原激活肽(TAP)elisa試劑盒

大腸桿菌志賀樣毒Ⅱ型突變體(O139菌型)抗體 DGCR2蛋白封閉多肽 大鼠補(bǔ)體因子H(CFH)試劑盒elisa

磷化結(jié)蛋白抗體 LHX3蛋白封閉多肽 大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)檢測(cè)試劑盒elisa
大鼠嗅鞘細(xì)胞HTR-8/SVneo人絨毛膜滋養(yǎng)層  細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HTR-8/SVneo細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HTR-8/SVneo人絨毛膜滋養(yǎng)層  細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HTR-8/SVneo細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HPNE人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HPNE細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HPNE人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HPNE細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HUCCT1人膽管癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HUCCT1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HUCCT1人膽管癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HUCCT1細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HUH-6人肝母瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HUH-6細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

 


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