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大鼠腸道干細胞

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更新時間:2023-04-23 09:14:39瀏覽次數:294

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腸組織
大鼠腸道干細胞的相關產品:原代CIK細胞添加劑細胞培養基5mL(100X)原代肌腱細胞添加劑細胞培養基5mL(100X)原代淋巴細胞添加劑細胞培養基5mL(100X)原代卵泡膜細胞添加劑細胞培養基5mL(100X)原代支持細胞添加劑細胞培養基5mL(100X)

詳細介紹

1.png

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠腸道干細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

腸組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腸道組織;腸道指的是從胃幽門至gang門的消化管。腸是消化管中長的一段,也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產物的吸收都是在小腸內進行的,大腸主要濃縮食物殘渣,形成糞便,再通過直腸經gang門排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養分,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內大的微生態系統。腸道干細胞(ISC)也稱腸道上皮干細胞,主要位于腸黏膜隱窩內,其與腸道黏膜上皮的更新和修復密切相關。正常情況下,位于隱窩基底部的腸道干細胞不斷向隱窩頂部(腸腔方向)遷移,整個遷移過程大約3-5d,在遷移過程中腸道干細胞分化形成不同的腸黏膜細胞。當受到外界生理或病理信號作用時,ISC可持續增殖、分化為成熟腸上皮細胞,如腸型細胞、杯狀細胞、內分泌細胞和潘氏細胞等,從而維持腸道黏膜結構和功能的穩定性。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯合消化后,用腸道干細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經MSI-1免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  懸浮

細胞形態  球形

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

亨廷頓相互作用蛋白M/X染色體開放閱讀框27抗體 1號染色體開放閱讀框192封閉多肽 

鐵蛋白Fe65樣蛋白1抗體 B細胞白血病/淋巴瘤蛋白7封閉多肽 

HS3ST6蛋白抗體 XVII型膠原蛋白/膠原蛋白17/17型膠原蛋白封閉多肽 

5-甲酰環連接抗體 多肽N-乙酰氨基半乳糖轉移1封閉多肽 

ENY2蛋白抗體 FAM25A蛋白封閉多肽 

淀粉樣肽前體蛋白抗體 氫離子轉運ATP合成6G封閉多肽 

鋅指蛋白28抗體 腦胰3封閉多肽 

磷化丁鹽反應因子1抗體 脫氫封閉多肽 

低密度脂蛋白受體相關蛋白10抗體 重組人白細胞介4受體蛋白 

磷化乙酰羧化抗體 天冬氨-胱氨特異性家族封閉多肽 

TRMT5蛋白抗體 ZDHHC6蛋白封閉多肽 

磷化有絲分裂原和應激活化型蛋白激2抗體 軸突蛋白3封閉多肽 

軸周蛋白PRX抗體 醌氧化還原封閉多肽 

9號染色體開放閱讀框21抗體 腎胺封閉多肽 

BRD1蛋白抗體 G蛋白偶聯受體激7封閉多肽 

FRMD5蛋白抗體 紅細胞糖苷α1封閉多肽 

微管相關蛋白抗體 耳蝸蛋白OTOS封閉多肽 

20號染色體開放閱讀框11抗體 心動加速蛋白多肽封閉多肽 
大鼠腸道干細胞人乳腺癌組織源細胞培養基100mL人乳腺癌組織源細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人乳腺癌組織源細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人乳腺癌組織源細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人乳腺癌組織源細胞的體外培養。

DMEM高糖培養基,干粉5×1L-

大鼠骨細胞培養基100mL大鼠骨細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠骨細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠骨細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠骨細胞的體外培養。

SK-LU-1細胞專用培養基125mL×4SK-LU-1細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持SK-LU-1細胞佳的生長狀態。本產品中已包含SK-LU-1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SK-LU-1細胞的體外培養。

RIN-m5F細胞專用培養基125mL×4RIN-m5F細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持RIN-m5F細胞佳的生長狀態。本產品中已包含RIN-m5F細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于RIN-m5F細胞的體外培養。

SW 982 [SW-982; SW982]細胞專用培養基(DMEM)125mL×4SW 982 [SW-982; SW982]細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持SW 982 [SW-982; SW982]細胞佳的生長狀態。本產品中已包含SW 982 [SW-982; SW982]細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SW 982 [SW-982; SW982]細胞的體外培養。

人脈絡膜微血管內皮細胞培養基100mL人脈絡膜微血管內皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人脈絡膜微血管細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人脈絡膜微血管細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人脈絡膜微血管細胞的體外培養。


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