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小鼠睪丸支持細胞

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更新時間:2023-04-23 08:49:28瀏覽次數:245

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 睪丸組織
小鼠睪丸支持細胞的相關產品:兔牙齦上皮細胞原代細胞5×105兔鞏膜成纖維細胞原代細胞5×105兔視網膜微血管周細胞原代細胞5×105兔鼻腔粘膜上皮細胞原代細胞5×105兔眼外肌成纖維細胞原代細胞5×105

詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

小鼠睪丸支持細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

睪丸組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自睪丸;睪丸支持細胞又稱Sertoli細胞,在體內呈不規則的高錐體形,細胞基部附著在基膜上,頂部伸至曲精小管腔面。它是生精細胞的支架,為其提供必需的營養物質,能合成與分泌雄激素結合蛋白,為其提供高濃度的雄激素環境等,還具有構成血-睪屏障,形成睪丸內微環境,調節精子發生等功能。睪丸支持細胞是睪丸的主要組成細胞,能分泌多種生長因子和免疫抑制因子,不僅可為精子提供營養支持和免疫保護,也能對其他細胞,如胰島和神經細胞提供營養支持,而且當其與胰島或神經細胞共移植時,也能夠為這些細胞提供免疫保護,提高植活率。因此,睪丸支持細胞在細胞移植中具有廣泛的應用前景。制備高活率的Sertoli不僅對Sertoli的基礎研究有重要價值,而且在精子發生等領域有重要意義。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Fas-L免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

磷化原癌基因酪氨蛋白激Yes1抗體 鋅指蛋白195封閉多肽 

磷化肌動蛋白結合蛋白Girdin抗體 磷化粘著斑激封閉多肽 

磷化KB抑制蛋白激α抗體 黑色瘤生長刺激活性蛋白α/GROa封閉多肽 

英文名稱: Flag Tag 磷化絲/蘇氨蛋白激Plk1封閉多肽 

ZCCHC5蛋白抗體 癌癥亮氨拉鏈下調因子1樣蛋白封閉多肽 

富含亮氨重復跨膜神經元蛋白2抗體 CDK5激活結合蛋白1封閉多肽 

人微管相關蛋白Tau-4單克隆抗體 KBTBD7蛋白封閉多肽 

芳香基硫酯K抗體 同源盒蛋白PKNOX1封閉多肽 

B4GALT6抗體 γ-谷氨酰羧化封閉多肽 

溶質載體蛋白家族43成員2抗體 重組人CD122/IL2RB蛋白 

層粘蛋白α3抗體 纖維連接蛋白封閉多肽 

PWP2H蛋白抗體 背板膠質乙酰酯封閉多肽 

雙特異性磷抗體15抗體 泛樣蛋白Sumo2/3封閉多肽 

精子發生相關蛋白18抗體 CD44封閉多肽 

20號染色體開放閱讀框106抗體 G蛋白修補結構域蛋白1封閉多肽 

E3泛蛋白連接COP1抗體 FAM73B蛋白封閉多肽 

整合α7抗體 轉運蛋白2封閉多肽 

磷化原癌基因蛋白18抗體 超氧化物歧化1封閉多肽 
小鼠睪丸支持細胞L-WRN細胞專用培養基(新引進)125mL×4L-WRN細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持L-WRN細胞佳的生長狀態。本產品中已包含L-WRN細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于L-WRN細胞的體外培養。

人脂肪間充質干細胞成脂誘導培養基400mL人脂肪間充質干細胞成脂誘導培養基專門為人脂肪間充質干細胞成脂誘導分化而開發,針對人脂肪間充質干細胞的特性優化分化試劑的配方,可增加人脂肪間充質干細胞的成脂分化效果。本產品含血清成分,僅用于科研用途,不可用于診斷、治療、臨床及其他用途。人脂肪間充質干細胞成脂誘導培養基 ADP1:成分名稱添加體積人脂肪間充質干細胞成脂誘導分化誘導基礎培養基 ADP1175mLFBS20mL Glutamine2mL青鏈霉 Pennicillin-Streptomycin2mL胰島 Insulin400μLIBMX200μL Rosiglitazone200μL Dexamethasone200μL人脂肪間充質干細胞成脂誘導培養基 ADP2(維持培養基):成分名稱添加體積人脂肪間充質干細胞成脂誘導分化誘導基礎培養基 ADP2175mLFBS20mL Glutamine2mL青鏈霉 Pennicillin-Streptomycin2mL胰島 Insulin400μL染色劑油紅-O染色液                                                      10ML      注:各成分請根據試劑管上標簽標示溫度保存。

小鼠表皮角質形成細胞培養基100mL小鼠表皮角質形成細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠表皮角質形成細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠表皮角質形成細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠表皮角質形成細胞的體外培養。

SUM149PT細胞專用培養基125mL×4SUM149PT細胞專用培養由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持SUM149PT細胞佳的生長狀態。本產品中已包含SUM149PT細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SUM149PT細胞的體外培養。本產品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

McCoy's 5A(不含酚紅,含HEPES)500mL-

RPMI-1640 (Dutch改良)(不含葉、HEPES)500mL-

LNCaP clone FGC細胞專用培養基125mL×4LNCaP clone FGC細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持LNCaP clone FGC細胞佳的生長狀態。本產品中已包含LNCaP clone FGC細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于LNCaP clone FGC細胞的體外培養。

 


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