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人腎足突細胞

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更新時間:2023-04-21 13:36:36瀏覽次數:239

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腎組織
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詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腎組織;腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球內的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,而是流入出球小動脈。在腎小球內,微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進行。微血管中的血液經由超濾作用之后,形成濾液,滲入鮑氏囊內。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。足細胞(podocyte)即腎小囊臟層上皮細胞,它附著于腎小球基底膜(GBM)的外側,連同GBM和毛細血管內皮一起構成了腎小球血液濾過屏障。足細胞特殊的解剖位置,使得其體內研究較為困難;又由于正常成年機體的腎臟足細胞是一種終末分化細胞,體外培養的原代細胞不能增殖。足細胞呈星型多突狀,胞體較大,由胞體伸出許多突起,又稱足突(FP),呈指狀交叉復蓋于GBM外表面,并通過黏附分子和蛋白多糖分子與GBM相連。足細胞在正常情況下可以分泌GBM的主要組成成分,IV型膠原和纖維連接蛋白(FN);在促腎纖維化引資等刺激下還能分泌具有降解GBM作用的基質金屬dan白(MMPs)和組織dan白,從而在GBM的代謝平衡中發揮重要作用。足細胞之間鄰近的足突相互交替,形成了許多30-40nm的裂孔,孔上覆蓋一層厚4-6nm的裂孔隔膜,即腎小球足突間裂孔隔膜。后者是血漿蛋白通過脈管系統的后屏障,對于維持腎小球濾過屏障結構與功能完整性發揮關鍵作用。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用機械研磨過不同孔徑不銹鋼網篩結合膠原消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  上皮細胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人腎足突細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

腎組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

β防御3抗體 細胞色c氧化1封閉多肽 人前動力蛋白1(PROK1/EG-VEGF)ELISA試劑盒

GDF5OS蛋白抗體 肌動蛋白結合蛋白LIM蛋白3封閉多肽 人葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4)試劑盒ELISA

吲哚胺2,3-雙加氧抗體 迪格弗-梅爾基奧爾-克勞森綜合征相關蛋白封閉多肽 人葡萄糖6磷脫氫(G6PD)ELISA檢測試劑盒

RAS相關/干擾蛋白2抗體 G蛋白γ5/Gγ5 封閉多肽 人葡萄糖-6-磷/葡萄糖-6-磷酯(G-6-Pase)ELISA試劑盒

抑制蛋白結構域蛋白4抗體 cereblon蛋白封閉多肽 人破傷風(Tetanus)抗體(IgG)試劑盒ELISA

a-包襯蛋白抗體 MGAT4C蛋白封閉多肽 人蘋果脫氫1(MDH1)檢測試劑盒elisa

肉毒堿棕櫚酰基轉移1B抗體 Bcl2樣凋亡蛋白14封閉多肽 人平滑肌肌動蛋白(SMA)ELISA試劑盒

英文名稱: LMO4 細胞色c氧化11封閉多肽 人嘌呤核苷磷化(PNP)試劑盒ELISA

轉錄延伸因子B2抗體 舞蹈癥相關相互作用蛋白1/雌激相關受體樣蛋白1封閉多肽 人皮質抑/穩定蛋白(CORT)ELISA檢測試劑盒

甲基化樣蛋白21C抗體 RAS癌基因家族蛋白RAB40B封閉多肽 人皮質-3(Cortxin-3)ELISA試劑盒

鼻咽癌癌基因抗體 Thimet內肽封閉多肽 人皮質類固醇結合球蛋白(CBG)試劑盒ELISA

Tristetraprolin抗體 6號染色體開放閱讀框174封閉多肽 人皮動蛋白(CTTN)檢測試劑盒elisa

雞新城疫融合糖蛋白F2 血栓調節蛋白封閉多肽 人泡狀過表達癌癥促生存蛋白1(VOPP1/ECOP/GASP)ELISA試劑盒

血管壁相連蛋白樣蛋白1抗體 SEMCAP3蛋白封閉多肽 人排序連接蛋白3(SNX3)試劑盒ELISA

Myc基因肺癌相關蛋白抗體 枯草溶菌轉化1抑制劑封閉多肽 人偶聯因子6(CF6)ELISA檢測試劑盒

細胞維甲結合蛋白1抗體 5-羥色胺受體3封閉多肽 人牛奶過敏原特異性IgE抗體ELISA試劑盒

跨膜γ羧基蛋白4抗體 STOX1蛋白封閉多肽 人牛兒基焦磷合(GGPS1)試劑盒ELISA

GLIS2蛋白抗體 鋅指蛋白782封閉多肽 人XIIIB鏈(F13B)檢測試劑盒elisa
人腎足突細胞4T1小鼠乳腺癌細胞專用培養基英文名稱:4T1細胞專用培養基500ML

4T1+luc小鼠乳腺癌熒光標記細胞專用培養基英文名稱:4T1+luc細胞專用培養基125ML

4T1+luc小鼠乳腺癌熒光標記細胞專用培養基英文名稱:4T1+luc細胞專用培養基500ML

AML-12小鼠肝實質細胞專用培養基英文名稱:AML-12細胞專用培養基125ML

AML-12小鼠肝實質細胞專用培養基英文名稱:AML-12細胞專用培養基500ML

Ana-1小鼠巨噬細胞專用培養基英文名稱:Ana-1細胞專用培養基125ML

Ana-1小鼠巨噬細胞專用培養基英文名稱:Ana-1細胞專用培養基500ML
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

 


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