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小鼠骨骼肌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 11:02:32瀏覽次數(shù):238

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 骨骼肌組織
小鼠骨骼肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:H1人胚胎干細(xì)胞H1 (WA01)人細(xì)胞系1×106hacat人永生化表皮細(xì)胞人細(xì)胞系1×106HACAT+LUC人永生化表皮細(xì)胞熒光標(biāo)記人細(xì)胞系1×106HBE135-E6E7人支氣管上皮細(xì)胞人細(xì)胞系1×106HBL-100人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細(xì)胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,進(jìn)行隨意運(yùn)動(dòng)。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點(diǎn)、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細(xì)胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細(xì)胞膜下方。肌細(xì)胞內(nèi)有許多沿細(xì)胞長軸平行排列的細(xì)絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線。兩個(gè)Z線之間的區(qū)段,叫做一個(gè)肌節(jié)。骨骼肌細(xì)胞也稱橫紋肌細(xì)胞,細(xì)胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細(xì)胞膜下方,細(xì)胞多呈梭行,具有一定的方向性。骨骼肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3-5代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠骨骼肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

骨骼肌組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 尿苷二磷葡萄糖醛轉(zhuǎn)移2B4封閉多肽 人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒

磷化蛋白激AKT1,2,3抗體 重組人IL-3 (活性的, Tag free) 人粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)試劑盒ELISA

GATA結(jié)合蛋白3抗體 ENY2蛋白封閉多肽 人丙氨轉(zhuǎn)氨/谷丙轉(zhuǎn)氨(ALT/GPT)ELISA檢測(cè)試劑盒

間隙連接蛋白43抗體 CD85g封閉多肽 人天門冬氨轉(zhuǎn)氨/谷草轉(zhuǎn)氨(GOT/GPT)elisa試劑盒

分化相關(guān)基因NDRG1抗體 活化半胱胺蛋白-3封閉多肽 人肝脂(HL)試劑盒elisa

磷化真核啟動(dòng)因子2α抗體 腫瘤錯(cuò)配修復(fù)基因PMS2封閉多肽 人乙酰肝(HPA)檢測(cè)試劑盒elisa

轉(zhuǎn)錄因子Gli4/鋅指蛋白gli4抗體 急性髓細(xì)胞白血病1蛋白封閉多肽 人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA試劑盒

細(xì)胞表面趨化因子受體3(CD183)抗體 妊娠區(qū)帶蛋白PZP封閉多肽 人纖維連接相關(guān)抗原(FRA)試劑盒ELISA

多巴胺受體D1抗體 低密度脂蛋白受體結(jié)構(gòu)域蛋白3封閉多肽 人胃泌細(xì)胞抗體(GCA)ELISA檢測(cè)試劑盒

鋅指蛋白ZBTB3抗體 KLHDC4蛋白封閉多肽 人谷氨脫氫(GDH/GLDH)elisa試劑盒

DNAJB11蛋白抗體 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白83封閉多肽 人肝輔因子Ⅱ(HCⅡ)試劑盒elisa

促代謝型谷氨受體1抗體 纖維母細(xì)胞表面蛋白/Fibroblast Surface Protein封閉多肽 人膽(CA)檢測(cè)試劑盒elisa

金屬組織抑制因子-2單克隆抗體 血小板衍生生長因子相關(guān)蛋白1封閉多肽 人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒

核糖體蛋白S3抗體 骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白封閉多肽 人γ谷氨酰轉(zhuǎn)移(GGT)試劑盒ELISA

含纈酪肽蛋白單克隆抗體 鉀離子通道KIR2.3封閉多肽 人胃粘液(GM)ELISA檢測(cè)試劑盒

EXOC3L2蛋白/Hepatitis B Virus X antigen抗體 鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1封閉多肽 人透明質(zhì)結(jié)合蛋白(HABP)elisa試劑盒

同源盒蛋白D3抗體 CD339封閉多肽 人Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)試劑盒elisa

促卵泡刺激受體抗體 磷二羥酰基轉(zhuǎn)移封閉多肽 人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)檢測(cè)試劑盒elisa
小鼠骨骼肌細(xì)胞HK-2人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞英文名稱:HK-21×106角質(zhì)無血清培養(yǎng)基(D-KSFM 推薦:iCell-019) 提供STR鑒定報(bào)告

HKb-20人腎上皮細(xì)胞英文名稱:HKb-201×106DMEM+10%FBS+800μg/ml G418+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

HL 60(hl-60)人早幼粒白血病細(xì)胞英文名稱:HL 60(hl-60)1×106IMDM+20%FBS+1%P/S  提供STR鑒定報(bào)告

HL-7702[L-02]人肝細(xì)胞英文名稱:HL-7702[L-02]1×1061640+20%FBS+1%P/S提供STR鑒定報(bào)告

HMC3人小膠質(zhì)細(xì)胞英文名稱:HMC31×106MEM+10%FBS+1%P/S提供STR鑒定報(bào)告

HMEC-1人微血管內(nèi)皮細(xì)胞株英文名稱:HMEC-11×106內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系提供STR鑒定報(bào)告

HO-8910PM人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞英文名稱:HO-8910PM1×1061640+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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