試劑盒內(nèi)包含了ELISA實(shí)驗(yàn)所需的所有試劑和相關(guān)組份。簡(jiǎn)單快捷的方案設(shè)計(jì)和優(yōu)化的試劑配比，為科研工作者提供ELISA實(shí)驗(yàn)分析方案。
試劑盒內(nèi)含有分析所需的所有必需試劑，操作簡(jiǎn)單便捷；試劑盒內(nèi)組分經(jīng)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化，確保更高的檢測(cè)靈敏度
產(chǎn)品名稱：Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒說明書
英文名稱：AGRP ELISA Kit
規(guī)格：96T/48T
分析類型：夾心ELISA
樣本類型：血清、血漿、細(xì)胞上清等液體樣本
產(chǎn)品型式：96孔板，可拆
貯存方法：試劑盒未拆開，4℃保存。已拆開，標(biāo)準(zhǔn)品-20℃保存，其它4℃保存。
運(yùn)輸條件：4℃
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組成：
1 30倍濃縮洗滌液      20ml×1瓶
2 酶標(biāo)試劑                 6ml×1瓶
3 酶標(biāo)包被板              12孔×8條
4 樣品稀釋液              6ml×1瓶
5 顯色劑A液               6ml×1瓶   
6 顯色劑B液               6ml×1/瓶  
7 終止液                     6ml×1瓶
8 標(biāo)準(zhǔn)品                     0.5ml×1瓶
9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液           1.5ml×1瓶
10 封板膜                   2張
樣品收集、處理及保存方法
1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速 小心地分離。
2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
樣本要求 
1．樣本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
人肺鱗狀癌細(xì)胞；NCI-H226Cystatin A  胱抑素A/半胱氨酸蛋白酶抑制劑A抗體100 ul

人源口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系；TSCC1Cystatin C/CST3  胱抑素C/半胱氨酸蛋白酶抑制劑C抗體20 ul

肝癌細(xì)胞株 ；HepG2/TC155Cystatin B  胱抑素B/半胱氨酸蛋白酶抑制劑B抗體100 ul

人肺腺癌細(xì)胞；ZRLC-1PRODH  脯氨酸脫氫酶抗體100 ul

人舌癌細(xì)胞系；CTSC-3RAIDD  CASP2凋亡相關(guān)蛋白抗體100 ul

胃癌二甲雙胍耐藥細(xì)胞株；BGC823/二甲雙胍Cytoglobin  細(xì)胞球蛋白抗體100 ul

肝癌細(xì)胞株；LM3CYLD  微管結(jié)合蛋白CYLD抗體100 ul

人卵巢癌細(xì)胞；OV3R-PTXphospho-CYLD(Ser418)  磷酸化微管結(jié)合蛋白CYLD抗體20 ul

人卵巢癌細(xì)胞；SK3R-PTXCYP1A1  細(xì)胞色素P450 1A1抗體100 ul

人源性腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞舒尼替尼耐藥株；7SuRP450 1A2/CYP1A2  細(xì)胞色素P450 1A2抗體100 ul

人源性腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞舒尼替尼耐藥株；ACSuCYP11A1/P450SCC  細(xì)胞色素P450 11A1抗體20 ul

人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞系；LICCFCYP2C9  細(xì)胞色素P450 2C9抗體100 ul

人肝癌細(xì)胞系；HCCIH01CYP11B1  細(xì)胞色素P450 11B1抗體20 ul

人肝癌細(xì)胞系；HCCIH02Cytochrome P450 2D1  細(xì)胞色素CYP2D1抗體100 ul

人肝癌細(xì)胞系；HCCIH03CYP3A4  細(xì)胞色素P450 3A4抗體100 ul

人源性腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞舒尼替尼耐藥株；ACSuRCYP3A1  細(xì)胞色素P450 3A1抗體20 ul

曲妥珠單抗（赫塞?。┠退幍娜税┘?xì)胞；BT-474/HRCYP4A1  細(xì)胞色素P450 4A1抗體100 ul

人肝癌細(xì)胞株；Huh-7/F24CYP5A1/Thromboxane synthase  血栓素合成酶抗體20 ul
Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒說明書ELK1/FITC  熒光素標(biāo)記細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1IgG

Endo G /FITC  熒光素標(biāo)記核酸內(nèi)切酶GIgG

Phospho-ELk1 (Ser383) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗、大、細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1IgG

Emp1/FITC  熒光素標(biāo)記表皮膜蛋白1IgG

Endostatin/FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁IgG

envelope glycoproin Yellow fever virus/FITC  熒光素標(biāo)記抗黃熱病毒包膜糖蛋白IgG

 Beta-endorphin/FITC  熒光素標(biāo)記、大、、羊、牛beta內(nèi)啡肽IgG

ENPP1/PC-1/FITC  熒光素標(biāo)記抗核苷酸內(nèi)焦酸酶/酸二酯酶1IgG

EGFL7/FITC  熒光素標(biāo)記抗脈管發(fā)育(組裝)蛋白IgG
操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照隨貨說明書中圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。 
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。