詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 組織來源 |
大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞) | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 骨髓 |
商品詳細(xì)介紹:
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:
分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(zhǎng)骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時(shí),紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細(xì)胞是由骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的;樹突狀細(xì)胞分為成熟樹突狀細(xì)胞和未成熟樹突狀細(xì)胞,典型的未成熟樹突狀細(xì)胞呈半貼壁生長(zhǎng),在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,細(xì)胞大而形態(tài)不規(guī)則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內(nèi)細(xì)胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強(qiáng)的遷移能力,伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細(xì)胞,貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細(xì)胞由未成熟DC進(jìn)一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成,多數(shù)呈懸浮生長(zhǎng), 細(xì)胞呈圓形,細(xì)胞體積進(jìn)一步增大,表面大量粗細(xì)不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細(xì)胞或者單核細(xì)胞。未成熟DC細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細(xì)胞尚無特異性細(xì)胞表面分子標(biāo)志,主要通過形態(tài)學(xué)、組合性細(xì)胞表面標(biāo)志、在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中能激活初始T細(xì)胞等特征進(jìn)行鑒定。其中成熟樹突狀細(xì)胞表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,進(jìn)而激活T淋巴細(xì)胞,誘導(dǎo)免疫應(yīng)答,處于啟動(dòng)、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié);未成熟樹突狀細(xì)胞具有很強(qiáng)的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細(xì)胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答,不能激活T細(xì)胞的第二信號(hào),可導(dǎo)致T細(xì)胞無能,從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細(xì)胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達(dá)較低,一般在30%以下。
5.方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的采用密度梯度離心法分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細(xì)胞形態(tài)等綜合鑒定,純度可達(dá)80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 半貼半懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形、梭形、多角形,形態(tài)多樣
傳代特性 屬于高度分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): | 二、免疫熒光鑒定: |
| 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; |
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
鋅指蛋白749抗體 促血管平滑肌細(xì)胞分化因子封閉多肽
IZUMO4蛋白抗體 先心病相關(guān)蛋白TBX1封閉多肽
細(xì)胞色P450 4A1抗體 重組豬圓環(huán)病毒CAP蛋白
粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子3受體抗體 核因子κB抑制蛋白δ封閉多肽
RAS相關(guān)抑細(xì)胞生長(zhǎng)蛋白1抗體 C-肽封閉多肽
干擾α17抗體 脫氧核糖核1封閉多肽
腦富含膜附著信號(hào)蛋白1抗體 軟骨糖蛋白39封閉多肽
磷化周期依賴性激2抗體 重組人重組甲狀旁腺激受體蛋白
溶質(zhì)載體家族16成員8抗體 驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員22封閉多肽
脫氫10抗體 CYLC2蛋白封閉多肽
SCAND3蛋白抗體 真核翻譯起始因子1A封閉多肽
血小板源性生長(zhǎng)因子C抗體 INO80E蛋白封閉多肽
腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1、2、3、4抗體 富含脯氨蛋白19封閉多肽
TBC結(jié)構(gòu)域TB10A蛋白抗體 環(huán)指蛋白19封閉多肽
胃泌/蛙皮抗體 A型流感病毒核輸出蛋白封閉多肽
微小染色體維持缺陷蛋白5抗體 CD8封閉多肽
絲裂原活化蛋白激激8抗體 二磷腺苷核糖基化因子核苷交換因子2封閉多肽
磷化p21激活激6抗體 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A封閉多肽
大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)TPC-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4TPC-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持TPC-1細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含TPC-1細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于TPC-1細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
大鼠腎小球系膜細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠腎小球系膜細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠腎小球系膜細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠腎小球系膜細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠腎小球系膜細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
SW579 [SW 579; SW-579]細(xì)胞專用培養(yǎng)基(L15)125mL×4SW579 [SW 579; SW-579]細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持SW579 [SW 579; SW-579]細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SW579 [SW 579; SW-579]細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SW579 [SW 579; SW-579]細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
兔骺軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL兔骺軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持兔骺軟骨細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含兔骺軟骨細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔骺軟骨細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
MEM無糖 (含NEAA、HEPES,不含L-、酚紅)500mL-