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大鼠真皮成纖維細胞

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更新時間:2023-04-23 10:39:23瀏覽次數:227

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 皮膚組織
大鼠真皮成纖維細胞公司正在出售的產品:產品名稱:磷脂酰肌醇-4-激meiα(PI4Ka)重組蛋白英文名稱:Recombina Phosphatidylinositol-4-Kinase Catalytic Alpha (PI4Ka)產品名稱:腸細胞激mei(ICK)重組蛋白英文名稱:Recombina Iestinal Cell Kinase (ICK)產品名稱:腸細胞激mei(ICK)重組蛋白英

詳細介紹

1.png

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠真皮成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

皮膚組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自真皮組織;皮膚組織來源包括頭部、臉部、手、腳、腿、背部、腹部、包皮等體表部位皮膚,可依據需求選用;真皮,位于表皮深層,向下與皮下組織相連,真皮結締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質內。其內分布著各種結締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網狀層。真皮的結構組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的真皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。真皮成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構造和維持組織的正常形態,合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用先中性dan白消化、后胰dan白-膠原混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

血小板生成/巨核細胞集落刺激因子抗體 鋅指蛋白221封閉多肽 

溶質載體轉運蛋白家族35成員E1抗體 細胞膜蛋白Derlin封閉多肽 

驅動蛋白家族成員18B抗體 烷基甘油酮磷合封閉多肽 

核仁蛋白14抗體 環指蛋白14封閉多肽 

9號染色體開放閱讀框59抗體 SLFNL1封閉多肽 

泛蛋白連接Q1抗體 磷化eIF4E結合蛋白封閉多肽 

線粒體核糖體蛋白S14抗體 LYRM2蛋白封閉多肽 

腫瘤抑制基因野生型P53單克隆抗體 唾液結合性免疫球蛋白樣凝集1封閉多肽 

英文名稱: CTNND1 四分子交聯體16封閉多肽 

蛋白酪氨磷受體PTPRB抗體 RRAD封閉多肽 

多肽N-乙酰氨基半乳糖轉移13抗體 鹵脫鹵樣水解域內含蛋白1A封閉多肽 

糖皮質激受體DNA結合因子1抗體 單純皰疹病毒1型轉錄調節因子ICP22封閉多肽 

C抗體 線粒體內鈣結合天冬氨/谷氨載體蛋白封閉多肽 

CD7抗體 LYPD1蛋白封閉多肽 

半胱胺蛋白-13抗體 重組人微管相關蛋白亞型4蛋白 

POGK蛋白抗體 著絲粒蛋白V封閉多肽 

鋅指蛋白137抗體 活化半胱胺蛋白-9封閉多肽 

磷化轉錄接頭蛋白EP300抗體 DDX58封閉多肽 
大鼠真皮成纖維細胞NR8383 [AgC11x3A; NR8383.1] (大鼠肺泡巨噬細胞) (種屬鑒定正確)Ham's F-12K+20% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶

HaK (敘利亞倉鼠腎細胞)MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶

SW626 (人卵巢癌細胞) (DMEM) (STR鑒定正確) DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶

大鼠支氣管平滑肌細胞5×10?Cells/T25培養瓶

小鼠腸系膜平滑肌細胞5×10?Cells/T25培養瓶

兔臍帶間充質干細胞5×10?Cells/T25培養瓶

Super Tube (狗腎細胞)(種屬鑒定正確)DMEM/F12+0.05mM NEAA+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶


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