詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 組織來源 |
大鼠真皮成纖維細胞 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 皮膚組織 |
商品詳細介紹:
4.細胞簡介:
分離自真皮組織;皮膚組織來源包括頭部、臉部、手、腳、腿、背部、腹部、包皮等體表部位皮膚,可依據需求選用;真皮,位于表皮深層,向下與皮下組織相連,真皮結締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質內。其內分布著各種結締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網狀層。真皮的結構組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的真皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。真皮成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構造和維持組織的正常形態,合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。
5.方法簡介:
實驗室分離的采用先中性dan白消化、后胰dan白-膠原混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質量檢測:
實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態佳
消化液 0.25%胰dan白
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
實驗報告:
一、分離與培養: | 二、免疫熒光鑒定: |
| 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; |
血小板生成/巨核細胞集落刺激因子抗體 鋅指蛋白221封閉多肽
溶質載體轉運蛋白家族35成員E1抗體 細胞膜蛋白Derlin封閉多肽
驅動蛋白家族成員18B抗體 烷基甘油酮磷合封閉多肽
核仁蛋白14抗體 環指蛋白14封閉多肽
9號染色體開放閱讀框59抗體 SLFNL1封閉多肽
泛蛋白連接Q1抗體 磷化eIF4E結合蛋白封閉多肽
線粒體核糖體蛋白S14抗體 LYRM2蛋白封閉多肽
腫瘤抑制基因野生型P53單克隆抗體 唾液結合性免疫球蛋白樣凝集1封閉多肽
英文名稱: CTNND1 四分子交聯體16封閉多肽
蛋白酪氨磷受體PTPRB抗體 RRAD封閉多肽
多肽N-乙酰氨基半乳糖轉移13抗體 鹵脫鹵樣水解域內含蛋白1A封閉多肽
糖皮質激受體DNA結合因子1抗體 單純皰疹病毒1型轉錄調節因子ICP22封閉多肽
糜C抗體 線粒體內鈣結合天冬氨/谷氨載體蛋白封閉多肽
CD7抗體 LYPD1蛋白封閉多肽
半胱胺蛋白-13抗體 重組人微管相關蛋白亞型4蛋白
POGK蛋白抗體 著絲粒蛋白V封閉多肽
鋅指蛋白137抗體 活化半胱胺蛋白-9封閉多肽
磷化轉錄接頭蛋白EP300抗體 DDX58封閉多肽
大鼠真皮成纖維細胞NR8383 [AgC11x3A; NR8383.1] (大鼠肺泡巨噬細胞) (種屬鑒定正確)Ham's F-12K+20% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶
HaK (敘利亞倉鼠腎細胞)MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶
SW626 (人卵巢癌細胞) (DMEM) (STR鑒定正確) DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶
大鼠支氣管平滑肌細胞5×10?Cells/T25培養瓶
小鼠腸系膜平滑肌細胞5×10?Cells/T25培養瓶
兔臍帶間充質干細胞5×10?Cells/T25培養瓶
Super Tube (狗腎細胞)(種屬鑒定正確)DMEM/F12+0.05mM NEAA+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶