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大鼠氣管平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-21 11:10:43瀏覽次數:229

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 氣管
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詳細介紹

1.png

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠氣管平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

氣管

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環狀軟骨構成,有彈性,軟骨為“C"字形的軟骨環,缺口向后,各軟骨環以韌帶連接起來,環后方缺口處由平滑肌和致密結締組織連接,保持了持續張開狀態。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。氣管平滑肌是氣管的重要結構組成之一,在機體的正常生理過程中發揮著重要作用;能夠保持氣道張力,維持氣道管狀形態,從而有利于氣體流通,保持肺部通氣。氣管平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。氣管平滑肌細胞的異常是呼吸道疾病的重要病理特征之一,其增生、肥大是氣道重塑的關鍵。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯合消化法結合組織貼塊法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磷化細胞角蛋白8抗體 蛋白激Cη封閉多肽 人抗鈣調特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒

胰高血糖受體抗體 分泌型磷脂A2亞基5封閉多肽 人甲狀腺非肽激抗體(THAA)試劑盒ELISA

巨噬細胞移動抑制因子抗體 晚期包膜蛋白1封閉多肽 人抗類固醇生成細胞抗體(SCA)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: Caspase-7 環指蛋白88封閉多肽 人粒細胞特異性抗核抗體(GS-ANA)elisa試劑盒

原鈣粘附蛋白20抗體 早期內吞體相關蛋白1封閉多肽 人抗信號識別顆粒抗體(SRP)試劑盒elisa

Kruppel樣因子抗體 己醛醣鹽水解酵封閉多肽 人封閉抗體(BA)檢測試劑盒elisa

磷化熱休克蛋白-70抗體 基質金屬-1封閉多肽 人抗細胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒

過氧化4抗體 E4F轉錄因子1封閉多肽 人抗鈣抑抗體(ACAST-DⅣ)ELISAit高試劑盒ELISA

白介2受體a鏈/IL-2RA抗體 亮氨拉鏈蛋白封閉多肽 人卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA檢測試劑盒

TSN蛋白抗體 趨化樣因子超家族成員3封閉多肽 人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)elisa試劑盒

骨形態發生抑制蛋白SOST抗體 瞬時受體電位陽離子通道亞家族M成員1封閉多肽 人系統性紅斑狼瘡(SLE)試劑盒elisa

核苷腺苷轉移1抗體 乙型肝炎病毒X蛋白HBX封閉多肽 人抗抗體(GM1)檢測試劑盒elisa

α-L巖藻糖苷2抗體 脫氫肽1封閉多肽 人抗髓鞘相關糖蛋白抗體(MAGAb)ELISA試劑盒

信號調節蛋白α抗體 選擇性剪接因子3亞基3封閉多肽 人抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)試劑盒ELISA

Verprolin同源結構域包含蛋白3抗體 中心體蛋白27封閉多肽 人抗中性粒細胞抗體(ANA)ELISA檢測試劑盒

巢蛋白/神經上皮干細胞蛋白抗體 KLHDC8B蛋白封閉多肽 人抗載脂蛋白抗體A1(ApoA1)elisa試劑盒

Rho相關蛋白激1抗體 冷休克結構域蛋白C2封閉多肽 人抗胰島受體抗體(AIRA)試劑盒elisa

γ氨基丁運載蛋白3抗體 精氨加壓受體2封閉多肽 人抗胃壁細胞抗體(AGPA/PCA)檢測試劑盒elisa
大鼠氣管平滑肌細胞HUCCT1人膽管癌細胞英文名稱:HUCCT11×1061640+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報告

HUH-6人肝母細胞瘤細胞英文名稱:HUH-61×106DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS +1%P/S 提供STR鑒定報告

huh-7人肝癌細胞英文名稱:huh-71×106DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS +1%P/S 提供STR鑒定報告

huh-7.5.1人肝癌細胞英文名稱:huh-7.5.11×106DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS +1%P/S 提供HUH-7細胞STR鑒定報告

HUT-78人T淋巴細胞白血病細胞英文名稱:HUT-781×106IMDM+20%FBS+1%PS 提供STR鑒定報告

HUTU-80人十二脂腸腺癌英文名稱:HUTU-801×106MEM+10%FBS+1%P/S   提供STR鑒定報告

HUVEC人臍靜脈內皮細胞(原代細胞永生化)英文名稱:HUVEC1×106內皮細胞培養體系提供免疫熒光鑒定報告


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