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大鼠滑膜成纖維細胞

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更新時間:2023-04-21 16:22:39瀏覽次數:214

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 滑膜組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠滑膜成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

滑膜組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自滑膜組織;滑膜組織是位于關節腔內面的內襯結構,各種關節內疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節正常功能的重要組織結構,同時在各種關節疾患中也是主要病變部位。骨關節炎(OA)以關節軟骨退行性變為特征,其病理改變累及關節的各個組成部分,但絕不僅局限于軟骨,還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響,相互作用,共同加速關節的退變。滑膜細胞是構成滑膜層的大細胞群體,是維持關節正常功能的重要組織結構,它包埋在顆粒狀無定性的基質中,基質內有分散的纖維分布。滑膜由A型(巨噬樣滑膜細胞)、B型(成纖維樣滑膜細胞)以及C型(樹突細胞樣滑膜細胞)細胞組成。滑膜細胞主要功能:①滑膜細胞產生潤滑液成分,并且與關節腔的吸收和血液/潤滑液交換有關;②滑膜細胞增生,表現為不依賴于支持物生長,并且分泌大量的效應分子來促進炎癥和關節損壞;③是自身自分泌和旁分泌網絡中效應因子的一部分。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

熱休克因子1抗體 卷曲螺旋結構域蛋白69封閉多肽 

英文名稱: phospho-Tau (Thr181) 染色體卷曲螺旋域包含蛋白1封閉多肽 

尿調節蛋白抗體 鋅指蛋白202封閉多肽 

磷化乳腺癌抗雌激耐藥蛋白1抗體 磷化CD32B封閉多肽 

磷化致癌基因C-Myc抗體 β-連環蛋白/β-連環/β鏈接封閉多肽 

延伸突觸蛋白1抗體 連接蛋白JPH4封閉多肽 

CD74單克隆抗體 LIM結構域激2封閉多肽 

磷化GATA結合蛋白3抗體 p53凋亡刺激蛋白1封閉多肽 

細胞周期基因1蛋白抗體 真核啟動因子2α封閉多肽(eIFα2)封閉多肽 

高密度脂蛋白結合蛋白抗體 磷化蛋白激B封閉多肽 

血小板因子4抗體 Patched/PTCH封閉多肽 

囊性纖維化跨膜轉運調節因子抗體 KATNAL1蛋白封閉多肽 

白介-23受體抗體 P21蛋白激活的蛋白激6封閉多肽 

ETS1相關蛋白2抗體 膜轉運蛋白DISPA封閉多肽 

RAGEF2蛋白抗體 早老蛋白1+2封閉多肽 

英文名稱: Mast Cell Tryptase 腫瘤細胞轉移抑制蛋白封閉多肽 

同源盒蛋白A2抗體 線粒體復合物NDUFS3蛋白封閉多肽 

SKAP55蛋白抗體 細胞色P450 11A1封閉多肽 
大鼠滑膜成纖維細胞MEMα(不含酚紅)500mL-

DMEM高糖(不含酚紅)500mL-

兔腦靜脈血管內皮細胞培養基100mL兔腦靜脈血管內皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持兔腦靜脈血管內皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含兔腦靜脈血管內皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔腦靜脈血管內皮細胞的體外培養。

大鼠腦微血管內皮細胞培養基100mL大鼠腦微血管內皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠腦微血管內皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠腦微血管內皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠腦微血管內皮細胞的體外培養。

兔乳腺上皮細胞培養基100mL兔乳腺上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持兔乳腺上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含兔乳腺上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔乳腺上皮細胞的體外培養。

MIA PaCa-2細胞專用培養基125mL×4MIA PaCa-2細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持MIA PaCa-2細胞佳的生長狀態。本產品中已包含MIA PaCa-2細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MIA PaCa-2細胞的體外培養。

大鼠肺微血管內皮細胞培養基100mL大鼠肺微血管內皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠肺微血管內皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠肺微血管內皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠肺微血管內皮細胞的體外培養。

 


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