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大鼠鞏膜成纖維細胞

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更新時間:2023-04-21 11:46:20瀏覽次數:261

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 鞏膜組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠鞏膜成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

鞏膜組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自鞏膜組織,鞏膜是眼球壁的主要組成之一。是眼球纖維膜的后5/6部分。前方聯接角膜,后方與視神經的鞘膜延續。鞏膜在視神經穿出部附近厚,愈前愈薄,在肌腱附著處又復增厚。其與角膜交界處,外面有環形的角膜溝,深部有鞏膜靜脈竇。小兒的鞏膜為淺藍色,成年為白色,老年因脂肪沉著而帶黃色。鞏膜結構堅韌,有支持和保護眼內組織的作用。成纖維細胞是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用混合膠原消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳2-3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

氧固醇結合蛋白樣6抗體 磷化干擾誘導的雙鏈RNA活化蛋白激封閉多肽 人鳥苷解離抑制因子(GDI)ELISA試劑盒

PATL2蛋白抗體 可溶性載質轉運蛋白2B1封閉多肽 人八聚體轉錄因子(OTF2B)試劑盒ELISA

孕激受體抗體 NT5C3蛋白封閉多肽 人八聚體轉錄因子(OTF2A)ELISA檢測試劑盒

滑膜細胞凋亡抑制物1抗體 Toll樣受體銜接蛋白TICAM2封閉多肽 人脫氧尿三磷(DUTP)elisa試劑盒

英文名稱: BST2 重組人S100B蛋白 人協同刺激分子受體(CMR)試劑盒elisa

英文名稱: Di-Methyl-Histone H3 (Lys27) 半乳糖凝集相關蛋白GRP封閉多肽 人肽聚糖(PG)檢測試劑盒elisa

生長抑受體1抗體 核苷結合蛋白2封閉多肽 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA試劑盒

磷化腎上腺能受體β2/β2-AR抗體 溶質載體家族39成員11封閉多肽 人甘露糖(MN)試劑盒ELISA

FAS凋亡抑制分子3抗體 細胞壁合成蛋白43封閉多肽 人甘露糖受體(MR)ELISA檢測試劑盒

SEC14樣蛋白L3抗體 鋅指蛋白641封閉多肽 人未甲基化寡聚脫氧核苷(CpG-ODN)elisa試劑盒

質膜囊泡相關蛋白抗體 9號染色體開放閱讀框84封閉多肽 人甲酰甲硫氨(fMet)試劑盒elisa

微管蛋白特定伴侶蛋白E抗體 天冬氨家族蛋白封閉多肽 人ICE激活因子(IRAP)檢測試劑盒elisa

γ 谷氨酰半胱氨連接調節亞基抗體 催乳調節元件結合蛋白PREB封閉多肽 人非甲基化寡核苷(NON)ELISA試劑盒

TBX22蛋白抗體 細胞分裂周期蛋白7封閉多肽 人蛋白Z(ProteinZ)試劑盒ELISA

2’,3’-環腺苷-3’-磷二酯抗體 狂躁基因同源蛋白MFNG封閉多肽 人蛋白S(ProteinS)ELISA檢測試劑盒

唾液結合性免疫球蛋白樣凝集11抗體 磷化T細胞活化連接蛋白封閉多肽 人可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)elisa試劑盒

CD200受體抗體 磷化沉默調節蛋白1封閉多肽 人CCAAT增強子結合蛋白ε(C/EBPε)試劑盒elisa

英文名稱: Phospho-PKR (Thr446) 磷化絲裂原活化蛋白激3封閉多肽 人CCAAT增強子結合蛋白δ(C/EBPδ)檢測試劑盒elisa
大鼠鞏膜成纖維細胞SV40-MES-13小鼠腎小球系膜細胞英文名稱:SV40-MES-131×106D/F12+10%FBS+1%P/S(STR鼠源鑒定)報告

SVEC4-10小鼠淋巴結血管上皮樣細胞 英文名稱:SVEC4-101×106DMEM+10%FBS+1%P/S (STR鼠源鑒定)報告

TC-1小鼠肺上皮細胞英文名稱:TC-11×1061640+10% FBS+1%P/S(STR鼠源鑒定)報告

TCMK-1小鼠腎小管上皮細胞英文名稱:TCMK-11×106MEM+10%FBS+1%P/S (STR鼠源鑒定)報告

TM3小鼠睪丸間質細胞英文名稱:TM31×106DMEM/F12+2.5%FBS+5%馬血清+1%P/S (STR鼠源鑒定)報告

TM4正常小鼠睪丸Sertoli細胞英文名稱:TM41×106DMEM/F12+2.5%FBS+5%馬血清+1%P/S (STR鼠源鑒定)報告

U14小鼠子宮頸癌細胞英文名稱:U141×106DMEM +10%FBS+1%P/S(STR鼠源鑒定)報告

 


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