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大鼠神經小膠質細胞

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更新時間:2023-04-21 16:25:00瀏覽次數:218

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腦組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠神經小膠質細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

腦組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腦組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。小膠質細胞是神經膠質細胞的一種,相當于腦和脊髓中的巨噬細胞,是中樞神經系統(CNS)中的第一道也是主要的一道免疫防線。小膠質細胞大約占大腦中的神經膠質細胞的20%,小膠質細胞不停地清除著中樞神經系統中的損壞的神經,斑塊及感染性物質。無數臨床上和理學研究表明激活的小膠質細胞在神經退化類疾病的發病機理中起到十分重要的作用,如帕金森病、多發性硬化和阿茲海默癥等。但是過多激活或失控的小膠質細胞會引起神經毒性。它們是促炎因子和氧化應激的重要來源,如腫瘤壞死因子(TNF),一氧化氮,白介素等有神經毒性的物質。神經小膠質細胞的主要功能:①神經膠質出現在大腦發育早期向成熟階段轉化的過程中;②當程序性細胞死亡時,或在大腦發育的過程中,中樞神經系統受損或受到病理損壞時,神經膠質可做為大腦的巨噬細胞;③膠質細胞能在Ⅱ類組織相容性復合體表達CD-4陽性T細胞時表達抗原,能進行Fc介導的巨噬作用,并且與造血細胞和巨噬細胞組織共享抗原。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用消化法結合差速貼壁法,在培養基營養缺失數天后經搖床震蕩收集脫落細胞制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經小膠質細胞經CD11b免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  梭形、多角形

傳代特性  屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液  (12mM)

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

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實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

乳脫氫抗體 SAMD4B蛋白封閉多肽 

腫瘤抑抗體 核基質結合區結合蛋白1封閉多肽  

β-連環蛋白/β-連環/β鏈接單克隆抗體 核苷交換因子相關蛋白封閉多肽 

磷化血管生成受體2抗體 細胞角蛋白73封閉多肽 

NCKAP5蛋白抗體 跨膜蛋白NOTCH4配體封閉多肽 

ATP結合轉運因子1抗體 ATP依賴RNA解旋DDX46封閉多肽 

蛋白磷2A-B55α抗體 重組人3-磷甘油醛脫氫蛋白 

CD68抗體 丙氨蛋白激C底物Marcks封閉多肽 

泛結合7相互作用蛋白5抗體 細胞信號轉導分子Smad-1封閉多肽 

英文名稱: Procalcitonin(PCT) 酪蛋白激1結合蛋白封閉多肽 

防御β-113/β-defensin 113抗體 二甲基組蛋白H2B K5封閉多肽 

造血干細胞抗原CD133相關蛋白抗體 細胞分裂周期2樣蛋白激5封閉多肽 

松弛肽2/松弛2抗體 黑色瘤相關抗原gp100封閉多肽 

單核細胞趨化蛋白1抗體 細胞骨架相關蛋白4封閉多肽 

Saitohin蛋白抗體 HS3ST3B1蛋白封閉多肽 

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 半胱胺蛋白-6封閉多肽 

中心體相關蛋白激Nek2抗體 磷化原癌基因c-Raf封閉多肽 

DMRT2蛋白抗體 磷化腫瘤易感候選基因3封閉多肽 
大鼠神經小膠質細胞大鼠脊髓神經少突膠質細胞培養基100mL大鼠脊髓神經少突膠質細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠脊髓神經少突膠質細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠脊髓神經少突膠質細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠脊髓神經少突膠質細胞的體外培養。

豬主動脈內皮細胞培養基100mL豬主動脈內皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持豬主動脈內皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含豬主動脈內皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于豬主動脈內皮細胞的體外培養。

BS-C-1細胞專用培養基125mL×4BS-C-1細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持BS-C-1細胞佳的生長狀態。本產品中已包含BS-C-1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于BS-C-1細胞的體外培養。

OKT 11細胞專用培養基125mL×4OKT 11細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持OKT 11細胞佳的生長狀態。本產品中已包含OKT 11細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于OKT 11細胞的體外培養。

OE19細胞專用培養基125mL×4OE19細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持OE19細胞佳的生長狀態。本產品中已包含OE19細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于OE19細胞的體外培養。

KGN細胞專用培養基125mL×4KGN細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持KGN細胞佳的生長狀態。本產品中已包含KGN細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于KGN細胞的體外培養。

M-7細胞專用培養基125mL×4M-7細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持M-7細胞佳的生長狀態。本產品中已包含M-7細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于M-7細胞的體外培養。

 


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