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人呼吸道上皮細胞

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更新時間:2023-04-23 09:57:23瀏覽次數(shù):263

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 呼吸道
人呼吸道上皮細胞的相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 (人原髓細胞白血病細胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人大隱靜脈內(nèi)皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶人椎間盤纖維環(huán)細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶HBE135-E6E7 (人支氣管上皮細胞) (STR鑒定正確) 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶JEG-3 (人絨毛膜癌細胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25

詳細介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人呼吸道上皮細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

呼吸道

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自呼吸道;呼吸道是肺呼吸時氣流所經(jīng)過的通道,有肺脊椎動物的呼吸道分上、下兩部:鼻、咽和喉合稱上呼吸道。氣管及其以后一分再分的管道,合稱為下呼吸道,或稱為氣管樹。氣管樹是隨著動物的進化逐漸復(fù)雜化的。整個呼吸道內(nèi)表面都分布有分泌液和纖毛(鼻孔、咽后壁和聲帶黏膜除外),它能溫暖(或冷卻)、濕潤和凈化吸入的空氣,對于呼吸器官和機體有著保護作用。呼吸道以骨或軟骨做支架,其內(nèi)表面覆蓋著黏膜,黏膜內(nèi)分布著豐富的毛細血管。呼吸道上皮細胞屬于假復(fù)層纖毛柱狀上皮,分布于呼吸道的內(nèi)表面,主要由柱狀,杯形,梭形和錐形等不同形狀細胞組成。看上去像復(fù)層上皮,但實際上所有細胞底部均附于基膜上,屬單層上皮,故稱假復(fù)層柱狀上皮,上皮表面有纖毛,杯狀細胞可分泌粘液,包裹著大量細菌,借助纖毛不斷擺動將其慢慢移動至出消化道。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  上皮細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

5-羥色胺受體2B抗體 重組人TNFSF13B(Trimer)蛋白 

細胞死亡同源蛋白6抗體 神經(jīng)膠質(zhì)蛋白(肝癌相關(guān)基因2)封閉多肽 

同源盒蛋白HoxB3抗體 錨定蛋白B封閉多肽 

人促甲狀腺激β單克隆抗體(標記) 環(huán)指蛋白21封閉多肽 

跨膜蛋白SEMA3D抗體 賴氨酰氧化樣3封閉多肽 

CD59抗體 黑色瘤相關(guān)抗原D2封閉多肽 

線粒體核糖體蛋白L2抗體 肝癌缺失基因1封閉多肽 

AF488標記小鼠抗人CD8單克隆抗體 FAM76B蛋白封閉多肽 

ELAVL2+ELAVL4蛋白抗體 5-羥色胺受體4封閉多肽 

磷化肌球蛋白調(diào)節(jié)多肽9(平滑肌亞型)抗體 Ran結(jié)合蛋白4封閉多肽 

真核翻譯起始因子3F抗體 一氧化氮合成相互作用蛋白封閉多肽 

巨噬細胞炎性蛋白1β抗體 蛋白磷3調(diào)節(jié)亞基C封閉多肽 

上皮鈉離子通道蛋白D/δENaC抗體 二甲基化組蛋白H3K9封閉多肽 

鋅指蛋白2A亞單位1抗體 醛糖還原相關(guān)蛋白質(zhì)封閉多肽 

ras癌基因家族Rab3d抗體 組蛋白H3樣封閉多肽 

SQSTM1/P62單克隆抗體 NBPF8蛋白封閉多肽 

鋅指蛋白639抗體 口蹄疫病毒封閉多肽 

拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體 G蛋白偶聯(lián)受體66/神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U受體1封閉多肽 
人呼吸道上皮細胞兔骨髓單核細胞培養(yǎng)基100mL兔骨髓單核細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持兔骨髓單核細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含兔骨髓單核細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔骨髓單核細胞的體外培養(yǎng)。

DMEM/F12無糖 (含L-丙氨酰-L-、HEPES,不含酚紅)500mL-

人乳腺上皮細胞培養(yǎng)基100mL人乳腺上皮細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人乳腺上皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人乳腺上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人乳腺上皮細胞的體外培養(yǎng)。

人胃癌組織源成纖維細胞培養(yǎng)基100mL人胃癌組織源成纖維細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人胃癌組織源成纖維細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人胃癌組織源成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人胃癌組織源成纖維細胞的體外培養(yǎng)。

大鼠胰腺上皮細胞培養(yǎng)基100mL大鼠胰腺上皮細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠胰腺上皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠胰腺上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠胰腺上皮細胞的體外培養(yǎng)。

犬臍帶間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基100mL犬臍帶間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持犬臍帶間充質(zhì)干細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含犬臍帶間充質(zhì)干細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于犬臍帶間充質(zhì)干細胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

MEM (含NEAA、L-丙氨酰-L-)500mL-


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