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人結腸成纖維細胞

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更新時間:2023-04-23 10:37:24瀏覽次數(shù):251

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 結腸組織
人結腸成纖維細胞的相關產(chǎn)品:COS-1 (非洲綠猴SV40轉化的腎細胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人宮頸癌組織源細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠骨髓單核細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶293ET (人胚腎細胞(SV40T和EBNA1基因修飾細胞))1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人冠狀動脈平滑肌細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人結腸成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

結腸組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自結腸組織;結腸在右髂窩內續(xù)于盲腸,在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部分,大部分固定于腹后壁,結腸的排列酷似英文字母“M",將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為:黏膜(上皮層、固有層、黏膜肌層),黏膜下層(疏松結締組織),肌層(內環(huán)形、外縱行兩層平滑肌),外膜(纖維膜或漿膜)。結腸成纖維細胞主要分布于外膜(纖維膜或漿膜)結締組織內。成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的牙周膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。牙周膜成纖維細胞(PLFs)作為牙周膜的主體細胞,是牙周膜主要的間質細胞,它不僅具有合成膠原、基質、彈力纖維和糖蛋白的功能,還有吸收膠原吞噬異物的能力,還參與了牙周組織的病變、修復及再生過程。現(xiàn)在,利用牙周膜細胞建立體外模型,已經(jīng)成為有關員研究牙周組織疾病的重要手段。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3-5代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

磷化組蛋白去乙酰化4抗體 酪氨蛋白激受體B4封閉多肽 

初生多肽相關復合物亞單位α,肌肉特異型蛋白抗體 環(huán)腺苷應答元件結合蛋白5封閉多肽 

立即早期癌基因BRLF1/鼻咽癌基因抗體 酰基結合結構域蛋白6封閉多肽 

富含半胱氨的性分泌蛋白抗體 載脂蛋白1封閉多肽 

鈣粘蛋白相關的神經(jīng)受體2抗體 同源盒蛋白HOX13封閉多肽 

α1微球蛋白單克隆抗體 CD24封閉多肽 

突觸泡蛋白2C抗體 G蛋白偶聯(lián)受體24封閉多肽 

褪黑受體1A/松果體受體1A抗體 受體轉運蛋白3封閉多肽 

EVX2蛋白抗體 磷化胰島受體封閉多肽 

WDR68蛋白抗體 甲狀腺核轉錄因子-1封閉多肽 

二磷腺苷核糖基轉移4抗體 轉錄因子HES6封閉多肽 

1號染色體開放閱讀框106抗體 DNA損傷誘導轉錄蛋白4封閉多肽 

英文名稱: KT3-Tag 動力蛋白輕鏈 

磷化一氧化氮合成-1(神經(jīng)型)抗體 脫氫11/丙型肝炎病毒核心蛋白封閉多肽 

粘合連接相關蛋白1抗體 白三烯B4受體2封閉多肽 

SAMD9蛋白抗體 突觸結合蛋白5封閉多肽 

雌激受體β抗體 蛋白精氨N甲基4封閉多肽 

磷化雄激受體抗體 腺苷激2封閉多肽 
人結腸成纖維細胞大鼠卵巢顆粒細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠牙齦上皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

HBE (人支氣管上皮樣細胞)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠神經(jīng)少突膠質細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

HULEC-5a (人肺微血管內皮細胞) (STR鑒定正確)MCDB131+10ng/ml EGF+1μg/ml Hydrocortisone+10mM L-glutamine+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

LA795 (小鼠肺腺癌細胞)(種屬鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠子宮內膜基質細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

 


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