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豬脊髓星形膠質細胞

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更新時間:2023-04-23 08:54:14瀏覽次數:256

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 脊髓組織
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詳細介紹

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產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

豬脊髓星形膠質細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

脊髓組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自脊髓組織;脊髓是細細的管束狀的神經結構,位于脊柱的椎管內且被脊椎保護;是源自腦的中樞神經系統延伸部分。中樞神經系統的細胞依靠復雜的聯系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經信息。人和脊椎動物中樞神經系統的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發出成對的神經,分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H形(蝴蝶型)灰質區,主要由神經細胞構成;在灰質區周圍為白質區,主要由有髓神經纖維組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發出許多成對的神經(稱為脊神經)分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。脊髓是周圍神經與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經的出入可把脊髓也分為相應的31節,31對脊神經就是由不同的脊椎發出的。神經系統基本的結構和功能單位是神經元,即神經細胞,其大小和外觀在中樞神經系統中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體,內含神經絲、微管、內質網、游離核糖體和一個有明顯核仁的核。一些大神經元突起的粗面內質網可用Nissl染色顯示,在光鏡下是灰藍色斑塊狀,稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經元的突起,能在神經元之間傳遞電沖動,突起的大小和形態各不相同,很難用常規的顯微鏡鑒別。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經GFAP免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、EGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  梭形、多角形

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磷化絲裂原活化蛋白激激8抗體 8號染色體開放閱讀框77封閉多肽 

ras基因相關蛋白RAB39抗體 Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣封閉多肽 

LDB2蛋白抗體 結腸癌抗原3封閉多肽 

早期未分化視網膜及晶狀體蛋白EURL抗體 心肌營養1封閉多肽 

神經突觸13抗體 NAGPA蛋白封閉多肽 

吡哆醛激單克隆抗體 絲氨/蘇氨蛋白激NEK9封閉多肽 

肌球蛋白輕鏈多肽6B抗體 同源盒蛋白D4封閉多肽 

神經細胞凋亡調節轉化蛋白1/前蛋白轉化枯草溶菌9抗體 骨折骨痂蛋白1封閉多肽 

磷相互作用結構域蛋白1抗體 核受體輔助抑制因子2封閉多肽 

PE-Cy3標記小鼠抗人CD4單克隆抗體 缺氧誘導基因1B蛋白封閉多肽 

磷化GATA結合蛋白6抗體 巖藻糖轉移1封閉多肽 

甲基胞嘧啶雙加氧TET3抗體 重組人肌型肌激蛋白 

A型流感病毒H5N1凝集抗體 MIOS蛋白封閉多肽 

谷氧還蛋白/巰基轉移抗體 泛羧基末端水解5互相作用蛋白1封閉多肽 

MICAL樣蛋白2抗體 胰島生長因子樣家族成員4封閉多肽 

胞漿區相關蛋白GIPC2抗體 SMCHD1蛋白封閉多肽 

溶質載體家族22成員13抗體 缺氧誘導因子2α /HIF-2α/HIF-2-alpha封閉多肽 

降鈣受體抗體 重組人白介28A (活性的, Tag free) 
豬脊髓星形膠質細胞MKN74細胞專用培養基125mL×4MKN74細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持MKN74細胞佳的生長狀態。本產品中已包含MKN74細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MKN74細胞的體外培養。

H9c2(2-1)細胞專用培養基125mL×4H9c2(2-1)細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持H9c2(2-1)細胞佳的生長狀態。本產品中已包含H9c2(2-1)細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于H9c2(2-1)細胞的體外培養。

DMEM無糖 (不含酚紅、L-,含HEPES)500mL-

RPMI 8226細胞專用培養基125mL×4RPMI 8226細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持RPMI 8226細胞佳的生長狀態。本產品中已包含RPMI 8226細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于RPMI 8226細胞的體外培養。

小鼠下腔靜脈內皮細胞培養基100mL小鼠下腔靜脈內皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠下腔靜脈內皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠下腔靜脈內皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠下腔靜脈內皮細胞的體外培養。

Daudi細胞專用培養基125mL×4Daudi細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持Daudi細胞佳的生長狀態。本產品中已包含Daudi細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于Daudi細胞的體外培養。

MEM無糖 (含NEAA、L-丙氨酰-L-、HEPES,不含酚紅)500mL-


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