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人小腸黏膜上皮細胞

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更新時間:2023-04-23 09:55:52瀏覽次數:237

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 小腸組織
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詳細介紹

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產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人小腸黏膜上皮細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

小腸組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內,上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的,因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由黏膜、黏膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞,黏膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切;構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力,促使食物向下運動。腸黏膜上皮細胞是機體內外環境的重要屏障,持續暴露于大量抗原中,也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此,腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞,在黏膜免疫反應的起始階段發揮關鍵作用,它決定黏膜免疫反應的發生、性質和強度。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用先機械分離法、后膠原消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  上皮細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人類乳頭狀瘤病毒33 E6蛋白抗體 重組人TIGIT蛋白  

先天性紅細胞生成異常性貧血蛋白1抗體 S轉移A5封閉多肽 

驅動蛋白家族蛋白3抗體 ZDHHC19蛋白封閉多肽 

磷化磷酯Cγ1抗體 鈣激活鉀通道蛋白β1封閉多肽 

磷化乙酰羧化抗體 糖基磷脂酰肌醇錨連接蛋白1封閉多肽 

G蛋白結合蛋白2抗體 荊豆凝集1封閉多肽 

內分泌腺衍生血管內皮生長因子抗體 周期B1封閉多肽 

20號染色體開放閱讀框166抗體 血管緊張結合蛋白封閉多肽 

酪蛋白硫轉移1抗體 促凋亡BNIP3L蛋白封閉多肽 

神經細胞囊泡循環蛋白1抗體 亮氨羧基甲基轉移1封閉多肽 

MCART1蛋白抗體 12號染色體開放閱讀框50封閉多肽 

干擾β抗體 磷化酪氨激C-SRC封閉多肽 

溶質載體家族12成員8抗體 骨形態發生蛋白2受體封閉多肽 

離子通道蛋白Kv3.1抗體 重組人脂蛋白磷脂A2蛋白 

P53應答基因蛋白5抗體 DNA損傷修復基因XRCC9封閉多肽 

G蛋白偶聯受體106抗體 神經元引導蛋白3封閉多肽 

英文名稱: Bim 膠質細胞源性神經營養因子封閉多肽 

P2Y1受體抗體/嘌呤受體抗體 肝表達抗菌肽2封閉多肽 
人小腸黏膜上皮細胞人胰腺星狀細胞培養基100mL人胰腺星狀細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人胰腺星狀細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人胰腺星狀細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人胰腺星狀細胞的體外培養。

DMEM高糖 (含L-丙氨酰-L-,不含鈉、酚紅)500mL-

兔角膜內皮細胞培養基100mL兔角膜內皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持兔角膜內皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含兔角膜內皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔角膜內皮細胞的體外培養。

IMDM(不含酚紅)500mL-

UACC-812細胞專用培養基125mL×4UACC-812細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持UACC-812細胞佳的生長狀態。本產品中已包含UACC-812細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于UACC-812細胞的體外培養。

小鼠腎小管上皮細胞培養基100mL小鼠腎小管上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠腎小管上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠腎小管上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠腎小管上皮細胞的體外培養。

TE-12細胞專用培養基125mL×4TE-12細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持TE-12細胞佳的生長狀態。本產品中已包含TE-12細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于TE-12細胞的體外培養。


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