詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 組織來源 |
大鼠牙周膜成纖維細胞 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 牙周膜組織 |
商品詳細介紹:
4.細胞簡介:
分離自牙周膜組織;牙周膜(牙周韌帶、牙周間隙)是由致密結締組織所構成。多數纖維排列成束,纖維的一端埋于牙骨質內,另一端則埋于牙槽窩骨壁里,使牙齒固位于牙槽窩內;牙周膜內有神經、血管、淋巴和上皮細胞等。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的牙周膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。牙周膜成纖維細胞(PLFs)作為牙周膜的主體細胞,是牙周膜主要的間質細胞,它不僅具有合成膠原、基質、彈力纖維和糖蛋白的功能,還有吸收膠原吞噬異物的能力,還參與了牙周組織的病變、修復及再生過程?,F在,利用牙周膜細胞建立體外模型,已經成為有關員研究牙周組織疾病的重要手段。
5.方法簡介:
實驗室分離的采用膠原 - 胰dan白聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質量檢測:
實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態佳
消化液 0.25%胰dan白
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
實驗報告:
一、分離與培養: | 二、免疫熒光鑒定: |
| 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; |
配對盒基因1抗體 重組人β2-微球蛋白蛋白
整合樣金屬與樣3蛋白抗體 Ki67蛋白封閉多肽
短蛋白聚糖抗體 重組人CHI3L1蛋白
三磷腺苷依賴解旋DDX23抗體 絲/蘇氨蛋白質激II α封閉多肽
ELMOD2蛋白抗體 鋅指蛋白134封閉多肽
磷化堿性成纖維細胞生長因子受體1(CD331)抗體 粘蛋白15封閉多肽
泛樣蛋白抗體 HTF9C蛋白封閉多肽
二磷腺苷核糖基轉移5抗體 DHX37蛋白封閉多肽
KIAA1467蛋白抗體 ATP依賴RNA解旋DDX52封閉多肽
卵透明帶糖蛋白2抗體 染色體結構維持蛋白1封閉多肽
葡萄膜自身抗原Uaca抗體 血管緊張原封閉多肽
類固醇受體復合物蛋白FKBP5抗體 轉運蛋白SEC31B封閉多肽
液泡蛋白分選蛋白28抗體 長壽相關基因lASS4封閉多肽
防御β-108B/β-defensin 108B抗體 雄激受體相互作用蛋白4封閉多肽
微管卷曲蛋白SYNC抗體 重組人微管相關蛋白Tau-4
4-磷磷脂酰肌醇5激1樣蛋白抗體 磷化KLF5封閉多肽
MX1抗體 白細胞介-7受體a封閉多肽
蛋白激Aγ抗體 磺酰脲類藥物受體1封閉多肽
大鼠牙周膜成纖維細胞上皮細胞培養基100mL上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于上皮細胞的體外培養。
DMEM高糖 (含HEPES、雙抗,不含鈉)500mL-
Leibovitz's L-15(含L-丙氨酰-L-)500mL-
小鼠肺大動脈內皮細胞培養基100mL小鼠肺大動脈內皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠肺大動脈內皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠肺大動脈內皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠肺大動脈內皮細胞的體外培養。
MDA-MB-415細胞專用培養基(DMEM)125mL×4MDA-MB-415細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持MDA-MB-415細胞佳的生長狀態。本產品中已包含MDA-MB-415細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MDA-MB-415細胞的體外培養。
McCoy's 5A(不含L-)500mL-
MCF-7/Taxol細胞專用培養基125mL×4MCF-7/Taxol細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持MCF-7/Taxol細胞佳的生長狀態。本產品中已包含MCF-7/Taxol細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MCF-7/Taxol細胞的體外培養。