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大鼠皮膚肥大細(xì)胞

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更新時間:2023-04-23 10:34:37瀏覽次數(shù):243

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 皮膚組織
大鼠皮膚肥大細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:TM4 (正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞) (種屬鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶U-87 MG (人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶T84 (人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人臍靜脈平滑肌細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶PC-3M IE8 (人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自皮膚組織;皮膚肥大細(xì)胞廣泛分布于皮膚微血管周圍,分泌多種細(xì)胞因子,參與免疫調(diào)節(jié)(T細(xì)胞、B細(xì)胞、APC細(xì)胞活化)。皮膚肥大細(xì)胞表達(dá)MHC分子、B7分子,具有APC功能。表達(dá)大量的IgE-Fc受體,釋放過敏介質(zhì)。具有弱吞噬功能,和血液的嗜堿粒細(xì)胞同樣,具有強(qiáng)嗜堿性顆粒的組織細(xì)胞。存在于血液中的這類顆粒,含有肝素、組織胺、5-羥色胺,由細(xì)胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質(zhì),可在組織內(nèi)引起速發(fā)型過敏反應(yīng)(炎癥)。由于在肥大細(xì)胞上結(jié)合的IgE抗體和抗原的接觸,使細(xì)胞多陷于崩壞。肥大細(xì)胞呈圓形或卵圓形,細(xì)胞核小,呈圓形或橢圓形,染色淺,位于細(xì)胞中央。細(xì)胞常成堆或單個分布于血管附近。細(xì)胞呈圓形或卵圓形,細(xì)胞質(zhì)中充滿大小一致、染成藍(lán)紫色的顆粒,均勻分布在核周圍。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原 - 胰dan白混合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD117免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  懸浮

細(xì)胞形態(tài)  圓形

傳代特性  屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠皮膚肥大細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

皮膚組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

腺苷單磷活化蛋白激β1抗體 膠質(zhì)細(xì)胞谷氨運(yùn)載蛋白1封閉多肽 

染色體相關(guān)蛋白H抗體 AKIRIN2蛋白封閉多肽 

NK細(xì)胞受體2D抗體 膽汁鹽輸出泵/ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白11封閉多肽 

內(nèi)收蛋白a1抗體 KIAA0427蛋白封閉多肽 

睪丸蛋白聚糖1抗體 G氨基丁A型受體rho1/GABAA Rρ1封閉多肽 

絨毛蛋白抗體 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子3相互作用蛋白1封閉多肽 

SEMCAP3蛋白抗體 軸蛋白1封閉多肽 

英文名稱: TROP2 鈉離子通道相關(guān)蛋白1封閉多肽 

NEC1抗體 生長抑受體2封閉多肽 

GRAMD1C蛋白抗體 三磷腺檸檬裂解封閉多肽  

細(xì)胞角蛋白3抗體  血紅氧合 1/熱休克蛋白32封閉多肽 

金屬調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子2抗體 凋亡蛋白活性因子-1封閉多肽(N端) 

腫瘤壞死因子配體超家族成員15抗體 真核翻譯起始因子5封閉多肽 

補(bǔ)體C7抗體 9號染色體開放閱讀框71封閉多肽 

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移輕鏈2抗體 肉毒堿棕櫚酰基轉(zhuǎn)移2封閉多肽 

英文名稱: villin FGD1蛋白封閉多肽 

Biotin標(biāo)記小鼠抗人CD3單克隆抗體 環(huán)指蛋白5封閉多肽 

型鋅指蛋白5抗體 磷化表皮生長因子受體封閉多肽 
大鼠皮膚肥大細(xì)胞大鼠子宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠子宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠子宮頸上皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠子宮頸上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠子宮頸上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠下頜骨成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠下頜骨成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠下頜骨成纖維細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠下頜骨成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠下頜骨成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠牙周膜干細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠牙周膜干細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠牙周膜干細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠牙周膜干細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠牙周膜干細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

PA-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4PA-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持PA-1細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含PA-1細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于PA-1細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MDA-MB-468-06細(xì)胞專用培養(yǎng)基(L15)125mL×4MDA-MB-468-06細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持MDA-MB-468-06細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MDA-MB-468-06細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MDA-MB-468-06細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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